2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩83頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  鼻腔給藥系統(tǒng)以其吸收迅速、起效快、生物利用度高等特點(diǎn)成為了近年來(lái)研究較多的可實(shí)現(xiàn)腦靶向作用的給藥途徑之一。報(bào)道稱藥物經(jīng)鼻腔給藥后除直接透過(guò)血腦屏障外,還可繞過(guò)血腦屏障直接進(jìn)入腦組織,提高藥物的腦靶向性。同時(shí),納米制劑作為新型的靶向劑型在鼻腔給藥方面的應(yīng)用受到了越來(lái)越多的關(guān)注,其制劑分子小,生物利用度高,易透過(guò)血腦屏障進(jìn)入腦組織,能夠增強(qiáng)藥效,降低毒性,為藥物的體內(nèi)藥效學(xué)和代謝動(dòng)力學(xué)賦予新的特色,因此,其在腦靶向性方面的

2、應(yīng)用具有很大的研究前景。綜合上所述,本課題展開“環(huán)維黃楊星D納米粒的制備與腦靶向性評(píng)價(jià)”,結(jié)合鼻腔給藥和納米制劑的雙重優(yōu)勢(shì),建立環(huán)維黃楊星D納米粒的質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn);制劑前期應(yīng)用腦微透析技術(shù)建立腦局部藥動(dòng)的研究,探討環(huán)維黃楊星D鼻腔給藥在腦靶向性方面的優(yōu)勢(shì)。制劑后期對(duì)環(huán)維黃楊星D納米粒腦靶向性進(jìn)行系統(tǒng)全面的評(píng)價(jià)研究。
  方法:
  1、環(huán)維黃楊星D HPLC分析方法的建立
  環(huán)維黃楊星D(CVB-D)分子結(jié)構(gòu)中不含有雙

3、鍵,采用紫外檢測(cè)器直接測(cè)定屬于末端吸收,其專屬性差、靈敏度低。本研究利用其結(jié)構(gòu)中含有仲氨基的特點(diǎn),采用異氰酸苯酯衍生化的方法,柱前衍生化后采用HPLC-UV的方法測(cè)定,并考察色譜條件的專屬性、標(biāo)準(zhǔn)曲線、精密度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性等。
  2、環(huán)維黃楊星D HPLC-MS/MS分析方法的建立
  CVB-D屬于脂溶性生物堿,微透析采樣技術(shù)使用接近內(nèi)環(huán)境的水性灌流液,因此,探針的回收率低,因此,本研究又建立了CVB-D HPLC-M

4、S/MS分析方法,本方法具有高度的特異性,靈敏度高,又省去了衍生等操作帶來(lái)的誤差,因此,能夠準(zhǔn)確測(cè)定微透析樣品中CVB-D濃度,提升數(shù)據(jù)的可靠性。研究同時(shí)考察了該色譜條件的專屬性、標(biāo)準(zhǔn)曲線、精密度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性、萃取回收率、基質(zhì)效應(yīng)等。
  3、微透析采樣灌流液改性劑的應(yīng)用及CVB-D反向微透析的采樣方法建立
  微透析采樣技術(shù)中的灌流液包括的人工腦脊液和林格氏液都是接近于人體內(nèi)環(huán)境的水性灌流液,CVB-D在水中的溶解度為

5、0.105mg/mL,溶解度低,因此探針的回收率也較低,本研究在前期的研究結(jié)果上(考察的灌流液改性劑有:乙醇、β-環(huán)糊精、丙三醇、二甲基亞砜),確定使用30%的乙醇作為灌流液改性劑。(詳情見(jiàn)本課題組成員劉新國(guó)博士畢業(yè)論文)。
  4、大鼠經(jīng)灌胃、鼻腔和尾靜脈注射給予CVB-D后的整體和局部藥動(dòng)學(xué)比較
  大鼠經(jīng)灌胃、鼻腔和尾靜脈給于CVB-D后,聯(lián)合微透析技術(shù)和LC-MS/MS分析方法,同時(shí)對(duì)大鼠血液和腦部進(jìn)行微透析采樣,比

6、較其給藥后腦和血液的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)、口服絕對(duì)生物利用度、AUC腦/AUC血液、DTE%、DTP%等,探討鼻腔給藥與其他兩種給藥方式相比較是否存在有一定的腦靶向優(yōu)勢(shì)。
  5、CVB-D殼聚糖納米粒的制備
  本研究采用修飾的離子交聯(lián)法制備了載藥殼聚糖納米粒,以納米粒的粒徑、PDI(分散指數(shù))以及包封率為考察指標(biāo),通過(guò)單因素考察法優(yōu)化了CVB-D殼聚糖納米粒的制各工藝,主要考察的因素包括有殼聚糖(CS)與多聚磷酸鈉(TPP)的質(zhì)量

7、比、攪拌速度與時(shí)間、溶液pH值、CS濃度和CVB-D的濃度等。
  6、CVB-D納米粒的腦靶向性評(píng)價(jià)
  大鼠經(jīng)鼻腔給予CVB-D殼聚糖納米粒(CS-NPs)、CVB-D溶液劑和尾靜脈給藥CVB-D CS-NPs后,分別在不同時(shí)間點(diǎn)腹主動(dòng)脈取血,脫頸處死,進(jìn)一步分離出嗅球、海馬和剩余腦組織,不同腦區(qū)和血液分別經(jīng)勻漿萃取處理后進(jìn)樣分析,分析藥物在腦組織中的分布情況,比較其不同組織部位的局部藥動(dòng)學(xué)參數(shù),如:MRT,AUC腦/A

8、UC血液、Cmax、Tmax、DTE%、DTP%等,并考察實(shí)驗(yàn)所制各的CVB-D CS-NPs是否具有腦靶向性,以期對(duì)CVB-D納米粒的腦靶向機(jī)制進(jìn)行探討。
  成果:
  1、建立了環(huán)維黃楊星D HPLC的分析方法
  色譜條件如下,儀器:Agilent1100;色譜柱:依利特C18(200×4.6,5um);Phenomenex C18保護(hù)住(4×2.0mm);流動(dòng)相,甲醇∶水=85∶15;流速:1ml/min;柱

9、溫:室溫;進(jìn)樣量:10uL;檢測(cè)波長(zhǎng):240nm;理論塔板數(shù)按CVB-D計(jì)不低于3000。
  2、建立了環(huán)維黃楊星D HPLC-MS/MS的分析方法色譜條件
  HPLC-MS/MS: Agilent1260和6460三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀;色譜柱:Agilent C18(150×4.6,5um); Phenomenex C18保護(hù)住(4×2.0 mm);流動(dòng)相:甲醇:水(0.1%甲酸和5mmol/L乙酸銨)=50∶50;流速:

10、1ml/min,接三通分流;柱溫:40℃;進(jìn)樣量:5uL;
  質(zhì)譜條件
  電噴霧離子(ESI)源與MassHunter B05數(shù)據(jù)采集器;噴霧電壓:3500v;霧化氣壓:45psi;加熱毛細(xì)管溫度:300℃;正離子方式檢測(cè),掃描方式為多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM),用于定量的離子分別為環(huán)維黃楊星Dm/z403.4(母離子)→372.3(子離子);多奈哌齊(內(nèi)標(biāo)):m/z380.2(母離子)→243.1(子離子),掃描時(shí)間為0.5

11、s;
  3、在前期的研究結(jié)果上(考察的灌流液改性劑有:乙醇、β-環(huán)糊精、丙三醇、二甲基亞砜),確定使用30%的乙醇作為灌流液改性劑,流速為1.0uL/min。
  4、采用微透析技術(shù)對(duì)大鼠血液和腦部同時(shí)進(jìn)行采樣,微透析樣品經(jīng)處理后測(cè)定,比較其給藥后腦局部和血液的整體藥動(dòng)學(xué)參數(shù),通過(guò)對(duì)AUC腦/AUC血液、DTE%、DTP%、口服絕對(duì)生物利用度等對(duì)比分析,結(jié)果證明鼻腔給藥與其他兩種給藥方式相比較存在有一定的腦靶向優(yōu)勢(shì)。

12、>  5、載藥殼聚糖納米粒完整的制備工藝條件為CS與TPP的質(zhì)量比為2.5∶1,CS濃度為1.8mg/ml,溶液pH調(diào)至5.0,攪拌速度為800rpm,時(shí)間0.5h,加入CVB-D的濃度為2.0mg/ml,得到包封率為62.82±2.59%,zeta電勢(shì)為+33.9±1.7 mV,粒徑在235.37±12.71nm范圍內(nèi)的CVB-D CS-NPs。
  6、通過(guò)對(duì)腦組織分布的研究發(fā)現(xiàn),藥物經(jīng)鼻腔給藥后繡球部位Cmax顯著升高,Tm

13、ax縮短,并且嗅球、海馬的藥時(shí)曲線均出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象,推測(cè)第一峰(0.5h左右)可能是藥物經(jīng)嗅球通路到達(dá)腦部,并通過(guò)查閱相關(guān)文獻(xiàn)推測(cè)第二峰(2或4h左右)可能是藥物經(jīng)三叉神經(jīng)通路進(jìn)入腦組織,同時(shí)結(jié)果證明本實(shí)驗(yàn)所制備CVB-D CS-NPs具有一定腦靶向性。
  結(jié)論:
  1、在既定的色譜條件下,CVB-D濃度與對(duì)應(yīng)峰面積比值線性關(guān)系良好,專屬性符合要求,樣品7.2min左右出峰,分離度良好,可用于CVB-D的定量分析。

14、  2、在既定的色譜質(zhì)譜條件下,CVB-D和內(nèi)標(biāo)多奈哌齊對(duì)應(yīng)峰面積比值和CVB-D濃度呈良好的線性關(guān)系,專屬性、日內(nèi)日間精密度、穩(wěn)定性、基質(zhì)效應(yīng)、樣品萃取回收率等考察指標(biāo)均能滿足生物樣品檢測(cè)要求,采用HPLC-MS/MS的分析方法能準(zhǔn)確穩(wěn)定地對(duì)CVB-D進(jìn)行定量分析。
  3、30%的乙醇能夠明顯提高探針的回收率,因此可以用做CVB-D的灌流液改性劑。
  4、本研究成功建立了微透析采樣技術(shù)在大鼠血液和腦部同時(shí)采樣的方法,同

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論