人參總皂苷對(duì)造血細(xì)胞和K562細(xì)胞EpoR表達(dá)的影響.pdf

1、人參是中醫(yī)學(xué)的“補(bǔ)氣生血”要藥，人參總皂苷(TSPG)是其主要藥物成分之一。我室既往的研究已表明：TSPG能夠促進(jìn)紅系祖細(xì)胞的增殖與分化，促K562等白血病細(xì)胞凋亡，抑制其增殖，但其分子機(jī)制仍然不清楚。紅細(xì)胞生成素受體(EpoR)在造血細(xì)胞的增殖分化和K562細(xì)胞抗凋亡和向紅系細(xì)胞分化過(guò)程中起著關(guān)鍵的作用，受體與紅細(xì)胞生成素結(jié)合后產(chǎn)生信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(STAT5)，最終啟動(dòng)相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄。本研究以臍血造血細(xì)胞和K562細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，在培養(yǎng)體系中

2、加入不同濃度TSPG與之共同培養(yǎng)24h，檢測(cè)兩者EpoR的變化，探討TSPG對(duì)兩者的EpoR表達(dá)的影響。現(xiàn)將各部分簡(jiǎn)介如下： 1.人參總皂苷對(duì)臍血造血細(xì)胞EpoR表達(dá)的影響：分離臍血單個(gè)核細(xì)胞，分組后用不同濃度TSPG(0，25，50，75，100mg/l)誘導(dǎo)24h，用流式細(xì)胞術(shù)，細(xì)胞ELISA測(cè)定細(xì)胞膜表面EpoR數(shù)量；細(xì)胞漿ELISA測(cè)定細(xì)胞漿內(nèi)EpoR數(shù)量；用免疫細(xì)胞化學(xué)染色觀察TSPG誘導(dǎo)前和誘導(dǎo)后細(xì)胞涂片中表達(dá)Epo

3、R的陽(yáng)性率。結(jié)果顯示：50mg/l組的細(xì)胞膜表面的EpoR較0mg/l對(duì)照組顯著增多，細(xì)胞漿內(nèi)EpoR數(shù)量無(wú)變化，TSPG誘導(dǎo)后細(xì)胞涂片中表達(dá)EpoR的細(xì)胞陽(yáng)性率較誘導(dǎo)前減少。結(jié)論：TSPG體外誘導(dǎo)臍血造血細(xì)胞能使其細(xì)胞膜表面的EpoR數(shù)量增加；細(xì)胞漿內(nèi)的EpoR數(shù)量未見(jiàn)增多，這可能是人參能促進(jìn)造血細(xì)胞增殖與誘導(dǎo)其向紅系細(xì)胞分化的機(jī)理之一。 2.人參總皂苷對(duì)K562細(xì)胞EpoR表達(dá)的影響：體外培養(yǎng)K562細(xì)胞，用不同濃度TSPG

4、(0，50，100，200，300，500mg/l)誘導(dǎo)24h，用流式細(xì)胞術(shù)，細(xì)胞ELISA，測(cè)定細(xì)胞膜表面EpoR數(shù)量；細(xì)胞漿ELISA測(cè)定細(xì)胞漿內(nèi)EpoR數(shù)量；用激光共聚焦顯微鏡觀察對(duì)照組和TSPG誘導(dǎo)組K562細(xì)胞免疫熒光圖象。結(jié)果顯示：200mg/l以上組的細(xì)胞膜表面的EpoR較0mg/l對(duì)照組顯著減少，細(xì)胞漿內(nèi)EpoR數(shù)量隨TSPG濃度增大而增多，TSPG誘導(dǎo)后細(xì)胞膜熒光強(qiáng)度較誘導(dǎo)前減弱。研究表明：TSPG可誘導(dǎo)K562細(xì)胞膜