siRNA抑制survivin基因表達(dá)對(duì)肺癌多藥耐藥株H460-cDDP化療敏感性的影響.pdf

1、本研究的目的是探討survivin在人大細(xì)胞多藥耐藥株H460/cDDP與敏感株H460之間的表達(dá)差異，通過siRNA抑制survivin表達(dá)逆轉(zhuǎn)耐藥株H460/cDDP對(duì)DDP、Taxol的耐藥性，從而探討survivin表達(dá)對(duì)H460/cDDP的耐藥性所發(fā)揮的作用。 [材料與方法] 采用RT-PCR、Westernblotting法分別檢測耐藥株H460/cDDP與敏感株H460的survivin表達(dá)。靶向survi

2、vinsiRNA經(jīng)脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染入耐藥株H460/cDDP，并用Westernblotting法檢測Survivin蛋白質(zhì)表達(dá)的變化。靶向survivinsiRNA作用于耐藥株H460/cDDP后，用MTT法分別檢測Taxol、DDP對(duì)耐藥株H460/cDDP的細(xì)胞毒作用，計(jì)算抑制50％細(xì)胞生長時(shí)的藥物濃度(IC50值)。 [結(jié)果] 耐藥株H460/cDDP的survivinmRNA和Survivin蛋白質(zhì)表達(dá)均明顯高于

3、敏感株H460(1.095±0.1978vs.0.132±0.0256，P＜0.0001；0.295±0.0570vs.0.105±0.0177，P＜0.0001)。靶向survivinsiRNA轉(zhuǎn)染耐藥株H460/cDDP后，Survivin蛋白質(zhì)明顯下調(diào)，其中survivinsiRNA作用72hr抑制率為92.3％，效果最佳。單用Taxol、DDP作用于耐藥株H460/cDDP，其IC50值分別為13.14±1.635、6.72±0

4、.732tg/ml，survivinsiRNA作用于耐藥株H460/cDDP后，使其TaxolIC50值減少35.70％(8.51±0.935μg/ml，P=0.006)，但DDPIC50值的變化沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(6.84±0.660μg/ml，P=0.605)。 [結(jié)論] 人大細(xì)胞肺癌多藥耐藥株H460/cDDP的survivin表達(dá)高于敏感株H460，靶向survivinsiRNA可以有效抑制耐藥株H460/cDDP的