戊四氮誘導(dǎo)大鼠癲癇模型建立和多藥耐藥基因產(chǎn)物PGP和MRP1表達(dá)的研究.pdf

1、目的： 1.建立戊四氮腹腔注射誘導(dǎo)的大鼠急性癲癇發(fā)作的模型，用苯巴比妥鈉干預(yù)，觀察大鼠癲癇發(fā)作表現(xiàn)；觀察癲癇發(fā)作后大鼠腦內(nèi)病理改變。 2.探索大鼠腦內(nèi)表達(dá)P-糖蛋白(P-glycoprotein,PGP)是否增強(qiáng)，出現(xiàn)時(shí)間，以及PGP表達(dá)是否與癲癇發(fā)作、苯巴比妥鈉應(yīng)用有關(guān)； 3.探索大鼠腦內(nèi)表達(dá)多藥耐藥相關(guān)蛋白-1(multi-drug resistanceassociated protein-1，MRP1)是否

2、增強(qiáng)，出現(xiàn)時(shí)間，以及MRP1表達(dá)是否與癲癇發(fā)作、苯巴比妥鈉應(yīng)用有關(guān)。 方法： 1.致癇組大鼠予以戊四氮(40mg～60mg/kg)，采用腹腔注射方法，誘發(fā)大鼠急性癲癇發(fā)作模型；干預(yù)組大鼠分為前干預(yù)組、后干預(yù)組，分別在戊四氮注射前0.5小時(shí)和后10分鐘加用苯巴比妥鈉腹腔注射(40mg/kg)；假模型組大鼠給予生理鹽水腹腔注射(2ml/只)；空白對(duì)照組不予任何處理；觀察所有大鼠癲癇發(fā)作與否、發(fā)作類型、起始時(shí)間、持續(xù)時(shí)間。獲取

3、大鼠腦組織標(biāo)本(以海馬為中心冠狀切片)，進(jìn)行HE染色。 2.運(yùn)用免疫組織化學(xué)技術(shù)比較空白對(duì)照組、假模型組、誘發(fā)癲癇6小時(shí)、24小時(shí)、3天、5天和7天后致癇組和干預(yù)組大鼠腦內(nèi)(以海馬為中心冠狀切片)PGP表達(dá)。試圖探索大鼠腦內(nèi)PGP是否增強(qiáng)，出現(xiàn)時(shí)間，以及PGP過(guò)度表達(dá)是否與癲癇發(fā)作、苯巴比妥鈉有關(guān)。 3.運(yùn)用免疫組織化學(xué)技術(shù)比較空白對(duì)照組、假模型組、誘發(fā)癲癇6小時(shí)、24小時(shí)、3天、5天和7天后致癇組和干預(yù)組大鼠腦內(nèi)(以海

4、馬為中心冠狀切片)MRP1蛋白水平的表達(dá)。試圖探索大鼠腦內(nèi)表達(dá)MRP1是否增強(qiáng)，出現(xiàn)時(shí)間，以及MRP1過(guò)度表達(dá)是否與癲癇發(fā)作、苯巴比妥鈉有關(guān)。 結(jié)果： 1.戊四氮腹腔注射建立的大鼠急性癲癇發(fā)作模型，其表現(xiàn)與人類癲癇發(fā)作相似；干預(yù)組大鼠癲癇發(fā)作程度輕，持續(xù)時(shí)間短；空白對(duì)照組、假模型組大鼠無(wú)癲癇發(fā)作。癲癇發(fā)作后大鼠腦內(nèi)病理改變明顯。 2.PGP的表達(dá)：致癇組大鼠腦內(nèi)檢測(cè)到較高水平的PGP表達(dá)，表達(dá)高峰在癲癇發(fā)作后第2

5、4小時(shí)；干預(yù)組大鼠PGP表達(dá)較低：空白對(duì)照組、假模型組大鼠腦內(nèi)PGP僅有微量表達(dá)；致癇組大鼠癲癇發(fā)作后第6小時(shí)、24小時(shí)、3天、5天和7天后腦內(nèi)PGP表達(dá)與空白對(duì)照組、假模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；干預(yù)組大鼠癲癇發(fā)作后第24小時(shí)、3天、5天和7天腦內(nèi)PGP表達(dá)與空白對(duì)照組、假模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；PTZ致癇組、后干預(yù)組與前干預(yù)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 3.MRPl的表達(dá)：致病

6、組大鼠腦內(nèi)檢測(cè)到較高水平的MRP1表達(dá)，表達(dá)高峰在癲癇發(fā)作后第7天；干預(yù)組大鼠MRP1表達(dá)較低；空白對(duì)照組、假模型組大鼠腦內(nèi)無(wú)MRP1表達(dá)。致癇組、前干預(yù)組大鼠癲癇發(fā)作后第6小時(shí)、24小時(shí)、3天、5天和7天腦內(nèi)MRP1表達(dá)與空白對(duì)照組、假模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；后干預(yù)組大鼠癲癇發(fā)作后第24小時(shí)、3天、5天和7天腦內(nèi)MRP1表達(dá)與空白對(duì)照組、假模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；PTZ致癇組與后干預(yù)組、前干預(yù)組