細(xì)莖石斛多糖DMP4a—1的結(jié)構(gòu)特性和免疫活性研究.pdf

1、石斛為名貴中草藥，石斛多糖是其主要的有效成分。本文以藥用石斛之一的細(xì)莖石斛為材料，以從其莖斷提取的多糖成分DMP4a-1為研究對象，對其結(jié)構(gòu)特性作了進(jìn)一步的分析；同時(shí)主要以巨噬細(xì)胞為模型研究了細(xì)莖石斛多糖DMP4a-1的免疫調(diào)節(jié)活性，主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：　　細(xì)莖石斛酸性多糖DMP4a-1為灰黃色絮狀固體，紫外分析推測其為蛋白多糖；經(jīng)高效液相凝膠滲透色譜分析，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線測得其分子量Mw3049；用其三甲基硅醚衍生物進(jìn)行氣相色譜分析主要由

2、葡萄糖，甘露糖，鼠李糖，阿拉伯糖和半乳糖組成，其分子摩爾比為：2.873：2.850：1.762：1.279：1；紅外光譜圖中895cm-1的吸收峰顯示該多糖為β-D吡喃糖；高碘酸氧化分析表明糖鏈結(jié)構(gòu)中存在1→4，1→3及1→6糖苷鍵其摩爾數(shù)比為1.194：2.430：1。由以上結(jié)果表明細(xì)莖石斛多糖DMP4a-1結(jié)構(gòu)特性較為復(fù)雜，是一種β(1→3)-D吡喃雜多糖?！　〖?xì)莖石斛酸性多糖DMP4a-1作用于對數(shù)生長期的巨噬細(xì)胞RAW264

3、.7后，用雙抗夾心ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中的TNFα濃度，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞迅速分泌TNFα，隨刺激時(shí)間的延長，TNFα量亦明顯增加(P＜0.01)；進(jìn)一步的濃度梯度實(shí)驗(yàn)證明在12.μg/ml時(shí)TNFα分泌量即有顯著升高(P＜0.01)，隨著DMP4a-1的刺激濃度升高，TNFα量亦隨著增加，說明其對巨噬細(xì)胞的刺激作用具有濃度依賴效應(yīng)。同時(shí)，DMP4a-1激活RAW264.7細(xì)胞后，亦可誘導(dǎo)細(xì)胞NO生成量迅速增加，并且其生成量也和DMP4a