ECHS1基因在肝癌細(xì)胞遷移中的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：肝細(xì)胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）是一種發(fā)病率高、病程短、且生存率極低的惡性腫瘤，占腫瘤致死病因的第二位，僅次于肺癌。大部分肝癌患者就診時(shí)已發(fā)現(xiàn)肝癌浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，嚴(yán)重影響預(yù)后和生存，目前尚無(wú)有效的治療肝癌的方法，近年來(lái)分子基因靶向治療惡性腫瘤成為醫(yī)學(xué)研究熱點(diǎn)。本課題主要探索烯脂酰輔酶A水合酶短鏈1（Short chain enoyl-CoA hydratase，ECHS1）對(duì)肝癌細(xì)胞遷移能力的影響及

2、其相關(guān)機(jī)制。
　　方法：首先應(yīng)用RNA干擾（RNA interference，RNAi）技術(shù)構(gòu)建穩(wěn)定干擾ECHS1基因的肝癌細(xì)胞株HepG2和Huh7，Western Blot檢測(cè)其干擾效果。隨后應(yīng)用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ECHS1干擾后的兩組肝癌細(xì)胞遷移情況。為探索其相關(guān)機(jī)制,RT-PCR檢測(cè)比較HepG2細(xì)胞干擾組和對(duì)照組中細(xì)胞遷移相關(guān)的多種基因mRNA相對(duì)表達(dá)量，最后利用Western Blot方法研究細(xì)胞

3、遷移相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：成功構(gòu)建了兩組干擾ECHS1表達(dá)的肝癌細(xì)胞株HepG2和Huh7（HepG2-siECHS1及其對(duì)照細(xì)胞株HepG2-pU6、Huh7-siECHS1及其對(duì)照細(xì)胞株Huh7-pLV)），Western Blot驗(yàn)證兩組細(xì)胞干擾效果顯著（P<0.05）。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示ECHS1干擾后的肝癌細(xì)胞遷移能力減弱。RT-PCR和Western Blot提示肝癌細(xì)胞干擾ECHS