人蛔蟲(chóng)體腔液對(duì)肺癌細(xì)胞株（A549）IL-6、TGF-β分泌的影響.pdf

1、南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文人蛔蟲(chóng)體腔液對(duì)肺癌細(xì)胞株（A549）IL6、TGFβ分泌的影響姓名：黃艷琴申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：袁鏗20060501入蛔蟲(chóng)體腔液對(duì)肺癌細(xì)胞株(A549)IL_6、TGFB分泌的影響研究生黃艷琴導(dǎo)師纛鏗摘要囂鰉：用人蛔蟲(chóng)體腔液(hscarisbodyfluid，ABF)干預(yù)體外培養(yǎng)的人肺腺瘸細(xì)胞株A549，探討ABF對(duì)A549細(xì)胞分泌L～6、TGF—B的影響，即ABF濃度和作糯時(shí)闖與I己一6

2、、TGF一分泌水平的關(guān)系，黻及ABF影響下靶緬胞乙一6、TGF—B分泌與細(xì)胞凋亡的關(guān)系。方法：i繪制A549纓脆生長(zhǎng)曲線：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的A549細(xì)胞常規(guī)消化計(jì)數(shù)，準(zhǔn)確將細(xì)胞分別接種于24孔培養(yǎng)板中，每日取3孔計(jì)數(shù)，連續(xù)觀察7天。掌握靶纓您基本生長(zhǎng)翅律。2ABF制備：對(duì)蛔蟲(chóng)感染者～次日服雙羥萘酸噻嘧啶(30mg／Kg體重)，服藥后從糞便中收集蛔蟲(chóng)成蟲(chóng)。取完整的蛔蟲(chóng)，經(jīng)自來(lái)水、涎菌生理鹽承洗凈看，濾紙吸予，挎鑷子夾往前端，使之垂直予瀵纛離心

3、管上，在蟲(chóng)體末端剪4口，體液自然流出，逐條收集。收集的液體在i0，000g離心30分鐘，取上清，經(jīng)0。45ixm醋酸纖維膜過(guò)濾除藏，用核酸蛋囪儀溺蛋自含壁為337099／ml，置一304C儲(chǔ)藏備饜。3細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的A549細(xì)胞常規(guī)消化計(jì)數(shù)，準(zhǔn)確將細(xì)胞分剮接嵇予96孔培養(yǎng)投中，將起始濃度藥3370弘g／ml的ABF倍比稀釋至135ixg／ml，用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性，取細(xì)胞存活率大予50％的ABF濃度為誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)的濃度范圍。4