人蛔蟲體腔液誘導人肺上皮細胞凋亡及bcl-2-bax表達.pdf

1、南昌大學醫(yī)學院碩士學位論文人蛔蟲體腔液誘導人肺上皮細胞凋亡及bcl2bax表達姓名：吳紅申請學位級別：碩士專業(yè)：病原生物學指導教師：彭衛(wèi)東20060601人蛔蟲體腔液誘導人肺上皮細胞凋亡及bcl2／bax表達碩士研究生吳紅導師彭衛(wèi)東摘要目的：用人蛔蟲體腔液(Ascarisbodyfluid，簡稱ABF)體外誘導人肺上皮細胞株(A549)，觀察其是否能夠誘導靶細胞凋亡及凋亡與ABF濃度和作用時間的相互關系；運用RTPCR方法檢測靶細胞誘導

2、過程中bcl2／bax基因的表達變化，探討其凋亡與基因表達的相互關系。方法：1標本采集：對新建縣昌邑小學學生進行驅蟲治療，一次口服雙羥萘酸噻嘧啶(30mg／Kg體重)，服藥后24dx時從糞便中收集人蛔蟲成蟲。2ABF的制各：取完整的蛔蟲，經自來水、無菌生理鹽水洗凈后，濾紙吸干，持鑷子夾住前端，使之垂直于消毒離心管上，在蟲體末端剪一小口，體液自然流出，逐條收集。收集的液體在10，000g離一530分鐘，取上清，經045m醋酸纖維膜過濾除菌

3、，用核酸蛋白儀測蛋白含量為3370蚓ml，置一30℃儲藏備用。3細胞凋亡測定(腿染色)：根據MTT法細胞毒性實驗結果，確定細胞存活率大于50％的ABF濃度作為實驗范圍，設定ABF濃度分別為3009∥ml、1009∥ml、309∥ml、1099ml和39∥ml：ff個濃度組，誘導人肺上皮細胞株，分別在誘導后的第l、3、5、7、9小時，采用HE染色計數，測定細胞凋亡率。4DNA提取及瓊脂糖凝膠電泳：對ABF濃度為1009∥ml、誘導時間為5