組織工程材料的表面修飾對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞粘附、增殖及定向成骨細(xì)胞分化的影響及體內(nèi)成骨效應(yīng).pdf

1、該文以下方面進(jìn)行探討:(1)采用不同原代細(xì)胞分離方法,研究其對(duì)MSCs細(xì)胞的生物學(xué)特性影響.(2)檢測基因勝肽膠對(duì)MSCs細(xì)胞粘附、增殖及分化的影響.(3)分別采用I型膠原及纖維粘連蛋白(fibronectin,FN)包被聚乙醇酸-乳酸共聚物(Poly(lactide-co-glycolide),PLGA)膜及多孔塊型PLGA材料,觀察細(xì)胞在單層或三維培養(yǎng)狀態(tài)下,I型膠原及FN對(duì)MSCs細(xì)胞粘附、增殖及向成骨細(xì)胞分化效應(yīng)及能力.(4)檢

2、測I型膠原對(duì)MSCs細(xì)胞骨架肌動(dòng)蛋白及細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子的影響,了解I型膠原促進(jìn)MSCs細(xì)胞粘附的內(nèi)在機(jī)制.(5)觀察經(jīng)I型膠原包被的多孔塊型PLGA材料體內(nèi)成骨效果,尤其是材料中心部位的成骨情況.為研制具有細(xì)胞粘附能力、高效誘骨效應(yīng)的新型活化人工骨提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和新的解決途徑.該研究結(jié)果提示:(1)密度梯度離心法和紅細(xì)胞裂解法均可用于分離純化MSCs細(xì)胞,對(duì)細(xì)胞的生物學(xué)特性無明顯影響.(2)利用旋轉(zhuǎn)法制膜、快速成形新工藝制備多孔塊型PLG

3、A材料,前者機(jī)器轉(zhuǎn)速恒定,后者在計(jì)算機(jī)控制下的數(shù)字化成形,保證了材料表面結(jié)構(gòu)、空間構(gòu)型等的較好統(tǒng)一.(3)基因勝肽膠可促進(jìn)MSCs細(xì)胞的早期粘附,但對(duì)于細(xì)胞晚期粘附、細(xì)胞增殖及細(xì)胞堿性磷酸酶活性均無明顯促進(jìn)作用,提示其不具備良好的材料表面修飾劑特性.(4)I型膠原、纖維粘連蛋白均能促進(jìn)細(xì)胞粘附,和細(xì)胞培養(yǎng)體系無關(guān),經(jīng)I型膠原、纖維粘連蛋白修飾的材料,細(xì)胞分布均勻,鋪展良好,顯示出良好的細(xì)胞相容性.(5)I型膠原、纖維粘連蛋白還可同時(shí)促進(jìn)

4、細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)MSCs細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化,是理想的骨組織工程材料表面修飾蛋白.(6)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明了I型膠原包被材料后的誘骨能力.(7)對(duì)MSCs細(xì)胞骨架actin及細(xì)胞內(nèi)鈣的檢測,表明I型膠原能促進(jìn)MSCs細(xì)胞骨架蛋白肌動(dòng)蛋白的組織和表達(dá),同時(shí)可增加細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度.說明細(xì)胞粘附和細(xì)胞內(nèi)肌動(dòng)蛋白的構(gòu)建和表達(dá)以及細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度有一定關(guān)聯(lián).綜上所述,骨組織工程高分子材料PLGA經(jīng)I型膠原、纖維粘連蛋白表面修飾后可明顯提高M(jìn)S