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1、目的:體外觀察羅格列酮與葡萄糖對(duì)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)向成骨細(xì)胞(OB)分化的影響,并觀察二者在促BMSCs向OB分化過(guò)程中對(duì)細(xì)胞因子堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、骨形成蛋白-2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(Transforming growth factor-beta1,TGF-β1)表達(dá)的影響,探討二者對(duì)骨代謝的作用機(jī)制。
2、 研究方法:無(wú)菌條件下從大鼠長(zhǎng)骨骨髓中分離獲取BMSCs,采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法對(duì)BMSCs進(jìn)行純化、傳代擴(kuò)增,并繪制細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,隨后在不同糖濃度(5.5mmol/L、25mmol/L)與不同濃度羅格列酮(1μmol/L、2μmol/L、5μmol/L、10μmol/L)干預(yù)下向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)21d,進(jìn)行茜素紅染色觀察礦化結(jié)節(jié)并測(cè)定OB的標(biāo)記物堿性磷酸酶(ALP)、骨形成蛋白-2(BMP-2)及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1
3、)表達(dá),比較各組中OB分化的情況。
結(jié)果:1μmol/L組、2μmol/L組、5μmol/L組、10μmol/L組的羅格列酮干預(yù)與成骨經(jīng)典組對(duì)比,OB的鈣結(jié)節(jié)形成比例顯著降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),ALP、BMP-2、TGF-β1活性的下降均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P均<0.05),2μmol/L組與1μmol/L組比較,ALP、BMP-2、TGF-β1活性的下降無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),5μmol/L組與2μm
4、ol/L組、10μmol/L組與5μmol/L組相比,ALP、BMP-2、TGF-β1活性的下降均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P均<0.05)。25mmol/L糖濃度經(jīng)典組與5.5mmol/L糖濃度經(jīng)典組相比,OB的鈣結(jié)節(jié)形成比例顯著降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),ALP、BMP-2、TGF-β1活性的下降均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。
結(jié)論:羅格列酮干預(yù)可促進(jìn)BMSCs向脂肪細(xì)胞分化從而抑制BMSCs向OB分化,且隨著
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