人黃體期卵母細(xì)胞的體外成熟及玻璃化冷凍的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　 探討采用未成熟卵母細(xì)胞體外成熟技術(shù)（invitromaturation，IVM）聯(lián)合玻璃化冷凍保存黃體期卵母細(xì)胞并觀察其復(fù)蘇、受精后的發(fā)育能力，以保存某些女性腫瘤患者的生育能力。
　　 方法:
　　 采用于2010年5月至2011年5月期間山東大學(xué)齊魯醫(yī)院婦產(chǎn)科手術(shù)待切除的卵巢組織表面穿刺獲取的256顆未成熟卵母細(xì)胞，按月經(jīng)周期分為卵泡期組（n=143顆）與黃體期組（n=113顆），各組間又分為新鮮

2、對(duì)照組及玻璃化冷凍組。其中新鮮對(duì)照組，體外培養(yǎng)成熟后行卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射受精(intracytoplasmicsperminjection，ICSI)，玻璃化冷凍組OCCs經(jīng)體外培養(yǎng)至M(II)期進(jìn)行玻璃化冷凍保存，解凍后行ICSI。IVM培養(yǎng)液配制成份:TCM199(M199，Sigma，USA)+75mIU/mlFSH(rFSH，Gonal-F，Serono)+2IU/mlHCG（麗珠醫(yī)藥，中國(guó)廣東）+0.2ug/ml17-β雌

3、二醇(E8004，Sigma，USA)+10％HFF+10％SSS(IrvineScientific，USA);冷凍載體為cryotop。分別比較各組間未成熟卵母細(xì)胞的體外成熟率、受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率及冷凍組的復(fù)蘇存活率，同時(shí)記錄、統(tǒng)計(jì)未成熟卵母細(xì)胞的體外成熟時(shí)間。
　　 結(jié)果:
　　 1.卵泡期與黃體期未成熟卵母細(xì)胞的體外成熟率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;兩組間的復(fù)蘇存活率68.0％VS48.1％，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.0

4、5);兩組的新鮮組間受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，冷凍組間差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2.與新鮮組相比，玻璃化冷凍使兩組卵母細(xì)胞的受精率、卵裂率均降低，有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 3.本研究采用自然周期，體外成熟時(shí)間主要在24-72h之間，最長(zhǎng)可達(dá)120h，其中24h、48h、72h成熟的卵母細(xì)胞分別占25.4％(65/256)、52.7％(135/256)、19.5％(50/256)。
　　 結(jié)論