牛卵母細胞玻璃化冷凍保存的研究.pdf

1、本論文主要探索了牛第二次減數(shù)分裂中期(MII期)卵母細胞和生發(fā)泡期(GV期)卵母細胞的玻璃化冷凍保存方法，研究結(jié)果如下： 分別用玻璃微細管(GMP)法和固體表面玻璃化(SSV)法冷凍保存牛MII期卵母細胞，結(jié)果表明，SSV法(32.6％)略優(yōu)于GMP法(27.1％)，但經(jīng)統(tǒng)計分析顯示，GMP法(27.1％)與ssv法(32.6％)的卵裂率差異不顯著(P>0.05)，兩種冷凍方法與未經(jīng)冷凍保存的對照組(57.9％)存在極顯著差異(

2、P<0.01)。 分別用體外受精和孤雌激活法對牛MII期卵母細胞和冷凍解凍后的卵母細胞進行體外培養(yǎng)，結(jié)果表明，SSV+孤雌激活組(2.7％)略優(yōu)于SSV+體外受精組(0.6％)，但經(jīng)統(tǒng)計分析顯示，SSV+體外受精組(0.6％)和SSV+孤雌激活組(2.7％)對冷凍后卵母細胞發(fā)育為囊胚的比率差異不顯著(P>0.05)，但冷凍組與未經(jīng)冷凍保存的對照組顯著極差異(0.6％，2.7％和23.2％，22.7％，P<0.01)。 不

3、同濃度細胞松弛素B(CB)預(yù)處理對牛體外成熟卵母細胞玻璃化冷凍后發(fā)育能力的影響，結(jié)果表明：存活率上，各濃度CB處理組與對照組沒有顯著差異(P>0.05)；激活后卵裂率上，20μg/ml CB處理組顯著高于對照組(47.67％和30.25％，P<0.05)；囊胚率上，20μg/ml CB處理組極顯著高于對照組(9.00％和1.75％，P≤0.01)，同時還顯著高于其它4個處理組(P<0.05)。說明CB在玻璃化冷凍過程中的保護作用存在一定