豬繁殖與呼吸綜合征病毒ORF5基因疫苗在小鼠體內(nèi)動(dòng)態(tài)分布與表達(dá).pdf

1、本研究將豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分別以6μg基因槍轟擊和200μg、100μg、50μg肌肉注射以及100μg+100μg豬白介素2真核表達(dá)質(zhì)粒(pcDNA-IL-2)聯(lián)合肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠，免疫后不同時(shí)間分別取各組BALB/c小鼠胃、腸、肝、脾、腎、心、肺、免疫部位肌肉和腦等組織器官。通過(guò)PCR、原位雜交、原位PCR以及免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)ORF5基因

2、疫苗以及ORF5基因疫苗表達(dá)產(chǎn)物在BALB/c小鼠體內(nèi)的動(dòng)態(tài)分布規(guī)律。結(jié)果表明： ①液相PCR比原位雜交和間接原位PCR檢測(cè)的靈敏度高；②間接原位PCR比原位雜交靈敏度高，檢測(cè)到基因疫苗在被免疫BALB/c小鼠中存留時(shí)間更長(zhǎng)并且檢測(cè)到雜交信號(hào)更強(qiáng)；③豬白介素2真核表達(dá)質(zhì)粒能延長(zhǎng)ORF5基因疫苗在被免疫BALB/c小鼠肌肉中存留時(shí)間多達(dá)30d；④在肌肉注射ORF5基因疫苗組的BALB/c小鼠所取組織中，基因疫苗的劑量和基因疫苗在組

3、織中的存留時(shí)間呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系；⑤基因槍轟擊組雖然基因疫苗轟擊免疫的劑量很小，然而在被免疫的BALB/c小鼠中存留時(shí)間也很長(zhǎng)，達(dá)到120d；⑥雖然基因槍轟擊基因疫苗劑量較少，基因槍轟擊組檢測(cè)到的基因疫苗表達(dá)產(chǎn)物的量卻超過(guò)同期肌肉注射組基因疫苗表達(dá)產(chǎn)物的量，同時(shí)在多種組織中基因疫苗都得到表達(dá)，這證明了基因槍轟擊和肌肉注射雖然都是ORF5基因疫苗良好的免疫途徑，但是基因槍轟擊免疫要優(yōu)于肌肉注射免疫；⑦豬白介素2真核表達(dá)質(zhì)粒同ORF5基因疫苗聯(lián)