戊四氮點(diǎn)燃模型大鼠海馬絲切蛋白及苔蘚纖維出芽的動(dòng)態(tài)變化.pdf

1、背景與目的:絲切蛋白（cofilin）是肌動(dòng)蛋白解聚蛋白家族（ADF/cofilin）的一個(gè)成員，普遍存在于真核細(xì)胞，其基本功能是在細(xì)胞內(nèi)結(jié)合和解聚F-肌動(dòng)蛋白（F-actin）。近年來(lái)，關(guān)于RhoGTP酶超家族及其參與的信號(hào)通路的研究成為熱點(diǎn)，而絲切蛋白cofilin在其中起著甚為重要的作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察戊四氮慢性點(diǎn)燃模型大鼠海馬組織中絲切蛋白cofilin（非磷酸化形式）表達(dá)與苔蘚纖維出芽的動(dòng)態(tài)變化，并利用Rho激酶抑制劑法舒地爾

2、對(duì)該模型大鼠進(jìn)行干預(yù)，探討Rho GTP酶超家族參與的信號(hào)通路和絲切蛋白在苔蘚纖維出芽中發(fā)揮的作用，從而為癲癇的治療提供新思路。 方法:清潔級(jí)健康雄性成年SD大鼠210只，隨機(jī)分為戊四氮組（84只）、法舒地爾干預(yù)組（即干預(yù)組，84只）和生理鹽水對(duì)照組（即對(duì)照組，42只），戊四氮組連續(xù)腹腔注射PT230mg/kg，每天一次，干預(yù)組每天注射戊四氮前30分鐘腹腔注射法舒地爾15mg/kg，對(duì)照組在注射戊四氮同時(shí)間點(diǎn)注射生理鹽水30mg

3、/kg。按第一次給藥后1天、3天、1周、2周、4周、6周和8周在三組內(nèi)再隨機(jī)均分為7個(gè)亞組。每個(gè)亞組平均分為兩個(gè)小組：一組用于免疫組化，檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)非磷酸化絲切蛋白cofilin在海馬CA3、CA1區(qū)、齒狀回和門區(qū)的表達(dá)；另一組用于Timm染色，檢測(cè)苔鮮纖維出芽情況。 結(jié)果: 1.動(dòng)物模型 戊四氮慢性點(diǎn)燃模型大鼠多在連續(xù)注射PTZ24～26天后被點(diǎn)燃。模型點(diǎn)燃率83.33％，死亡率3.57％。達(dá)到點(diǎn)燃標(biāo)準(zhǔn)的大鼠可

4、見(jiàn)自發(fā)發(fā)作及腦電圖癇性波，相同閾下劑量PTZ刺激可誘發(fā)癇性發(fā)作和腦電圖癇性波。 法舒地爾干預(yù)模型多在給藥第24～27天時(shí)點(diǎn)燃，其表現(xiàn)形式同戊四氮組，點(diǎn)燃率為86.11％，死亡率3.57％。對(duì)照組未見(jiàn)癇性發(fā)作及自發(fā)發(fā)作，腦電圖亦無(wú)見(jiàn)癇性波。 2.苔蘚纖維出芽的動(dòng)態(tài)變化 戊四氮組和干預(yù)組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)間CA3區(qū)苔蘚纖維出芽評(píng)分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而二組各時(shí)間點(diǎn)CA3區(qū)苔蘚纖維出芽評(píng)分與對(duì)照組相比除第1天外均有顯著性差異,

5、從3天起評(píng)分增高，達(dá)高峰時(shí)間為2周，并且維持至8周，2周至8周CA3區(qū)評(píng)分差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。齒狀回顆粒細(xì)胞上區(qū)苔蘚纖維出芽評(píng)分均為0～1分，各組時(shí)間點(diǎn)間比較無(wú)顯著性差異。對(duì)照組CA3區(qū)和齒狀回顆粒細(xì)胞上區(qū)苔蘚纖維出芽評(píng)分均僅0～1分，各時(shí)間點(diǎn)間比較無(wú)顯著性差異。 3.Cofilin（非磷酸化）表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化 戊四氮組和干預(yù)組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)間大鼠海馬各區(qū)非磷酸化cofilin表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與對(duì)照組比較二組非磷酸化co