戊四氮點燃模型大鼠海馬絲切蛋白及苔蘚纖維出芽的動態(tài)變化.pdf

1、背景與目的:絲切蛋白（cofilin）是肌動蛋白解聚蛋白家族（ADF/cofilin）的一個成員，普遍存在于真核細(xì)胞，其基本功能是在細(xì)胞內(nèi)結(jié)合和解聚F-肌動蛋白（F-actin）。近年來，關(guān)于RhoGTP酶超家族及其參與的信號通路的研究成為熱點，而絲切蛋白cofilin在其中起著甚為重要的作用。本實驗通過觀察戊四氮慢性點燃模型大鼠海馬組織中絲切蛋白cofilin（非磷酸化形式）表達與苔蘚纖維出芽的動態(tài)變化，并利用Rho激酶抑制劑法舒地爾

2、對該模型大鼠進行干預(yù)，探討Rho GTP酶超家族參與的信號通路和絲切蛋白在苔蘚纖維出芽中發(fā)揮的作用，從而為癲癇的治療提供新思路。 方法:清潔級健康雄性成年SD大鼠210只，隨機分為戊四氮組（84只）、法舒地爾干預(yù)組（即干預(yù)組，84只）和生理鹽水對照組（即對照組，42只），戊四氮組連續(xù)腹腔注射PT230mg/kg，每天一次，干預(yù)組每天注射戊四氮前30分鐘腹腔注射法舒地爾15mg/kg，對照組在注射戊四氮同時間點注射生理鹽水30mg

3、/kg。按第一次給藥后1天、3天、1周、2周、4周、6周和8周在三組內(nèi)再隨機均分為7個亞組。每個亞組平均分為兩個小組：一組用于免疫組化，檢測各時間點非磷酸化絲切蛋白cofilin在海馬CA3、CA1區(qū)、齒狀回和門區(qū)的表達；另一組用于Timm染色，檢測苔鮮纖維出芽情況。 結(jié)果: 1.動物模型 戊四氮慢性點燃模型大鼠多在連續(xù)注射PTZ24～26天后被點燃。模型點燃率83.33％，死亡率3.57％。達到點燃標(biāo)準(zhǔn)的大鼠可

4、見自發(fā)發(fā)作及腦電圖癇性波，相同閾下劑量PTZ刺激可誘發(fā)癇性發(fā)作和腦電圖癇性波。 法舒地爾干預(yù)模型多在給藥第24～27天時點燃，其表現(xiàn)形式同戊四氮組，點燃率為86.11％，死亡率3.57％。對照組未見癇性發(fā)作及自發(fā)發(fā)作，腦電圖亦無見癇性波。 2.苔蘚纖維出芽的動態(tài)變化 戊四氮組和干預(yù)組各相應(yīng)時間點間CA3區(qū)苔蘚纖維出芽評分差異無統(tǒng)計學(xué)意義；而二組各時間點CA3區(qū)苔蘚纖維出芽評分與對照組相比除第1天外均有顯著性差異,

5、從3天起評分增高，達高峰時間為2周，并且維持至8周，2周至8周CA3區(qū)評分差異無統(tǒng)計學(xué)意義。齒狀回顆粒細(xì)胞上區(qū)苔蘚纖維出芽評分均為0～1分，各組時間點間比較無顯著性差異。對照組CA3區(qū)和齒狀回顆粒細(xì)胞上區(qū)苔蘚纖維出芽評分均僅0～1分，各時間點間比較無顯著性差異。 3.Cofilin（非磷酸化）表達的動態(tài)變化 戊四氮組和干預(yù)組各相應(yīng)時間點間大鼠海馬各區(qū)非磷酸化cofilin表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義，與對照組比較二組非磷酸化co