慢性丙型肝炎感染者外周血CD81、CD4表達及臨床意義分析.pdf

1、目的： 深入探討HCV受體CD81及其感染靶細胞、慢性感染與免疫反應、細胞因子的作用等機制，在預防丙型肝炎感染、提高HCV臨床治療水平和監(jiān)測預后等方面具有重要意義。本研究采用流式細胞術檢測55例慢性丙型肝炎感染者和25例健康對照外周血CD81、CD4的表達水平，ELISA法檢測CHC感染者和對照組血清中自介素2的含量，結合RT-PCR法檢測外周血清中HCV-RNA的含量，全自動生化分析儀檢測外周血清中谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉

2、氨酶（AST）含量，分析感染者外周血淋巴細胞中CD81細胞和HCV-RNA、CD81淋巴細胞和CD3+CD4+CD81+T細胞，兩組中CD3+CD4+T細胞和IL-2，感染組ALT和AST、HCV-RNA和ALT、AST，ALT、AST分別與CD81+細胞、CD3+CD4+T細胞、CD3+CD4+CD81+T細胞之間的關系，探討HCV感染后對機體免疫系統(tǒng)的調變作用及感染慢性化的機制，并為制定丙型肝炎的防治方案提供理論和實驗依據。

3、 方法： 選取2008年1月到10月在濟南市傳染病醫(yī)院門診及住院接受治療的CHC患者55例，其中男38例，女17例，平均年齡40歲，均有輸血或輸血制品史，感染史至少在一年以上。慢性HCV感染的診斷符合2000年9月西安中華醫(yī)學會傳染病與寄生蟲病學分會、肝病學分會聯合修訂的病毒性肝炎防治方案。根據為：血清ALT升高、血清抗HCV抗體陽性和HCV-RNA的測定為>0×103copies/ml。所有病例近3個月內未使用免疫調節(jié)劑，均無

4、HAV、HBV、HEV或HGV感染，亦未合并其他嚴重疾病引起的急慢性肝損害。查體中心接受查體的正常健康人群25例，男16例，女9例，平均年齡41歲。分別構成實驗組和對照組。采用流式細胞術三色熒光染色法檢測慢性丙型肝炎感染者和健康對照組外周血淋巴細胞CD81、CD3+CD4+T細胞、CD3+CD4+CD81+T細胞的表達水平。酶聯免疫吸附試驗（ELISA）法檢測HCV感染者和健康對照組血清中IL-2的含量。逆轉錄酶PCR（RT-PCR）法

5、檢測HCV感染者血清中HCV-RNA的含量。全自動生化分析儀檢測兩組血清中ALT、AST含量。 結果： 1．55例CHC感染者外周血淋巴細胞中CD81分子的表達水平明顯高于健康對照組，P<0．01。 2．55例CHC感染者外周血中CD3+CD4+T細胞的表達水平明顯低于健康對照組，P<0．05。 3．55例CHC感染者外周血淋巴細胞中CD3+CD4+CD81+T細胞明顯高于健康對照組，P<0．01。

6、 4．55例CHC感染者血清中IL-2的水平明顯低于健康對照組，P<0．05。 5．55例CHC感染者，外周血淋巴細胞中CD81分子的表達水平與血清中HCV-RNA的含量呈明顯正相關性r=0．474，P<0．01，與CD3+CD4+CD81+T細胞呈明顯正相關，r=0．581，P<0．01；感染者和健康對照組外周血淋巴細胞中CD3+CD4+T細胞的表達水平與血清中IL-2的水平呈明顯正相關，r=0．378，P<0．05。CHC

7、感染者血清中ALT與AST之間有明顯的正相關關系，r=0．857，P<0．01；ALT、AST和HCV-RNA，ALT、AST與CD81+細胞、CD3+CD4+T細胞、CD3+CD4+CD81+T細胞之間未發(fā)現具有相關性。 結論： 1．CHC感染者外周血淋巴細胞中CD81分子的表達水平高于健康對照組，并與HCV-RNA的含量呈正相關，提示作為HCV感染靶細胞的受體，HCV的持續(xù)存在促進細胞表面CD81的高表達。

8、2．CHC感染者外周血中CD81高表達同時，CD3+CD4+T細胞的表達水平和血清中IL-2的含量明顯低于健康對照組，且血清中IL-2的水平與外周血淋巴細胞中CD3+CD4+T細胞表達呈正相關。說明CHC感染者細胞免疫功能明顯低于健康對照組。HCV感染發(fā)生后，CD3+CD4+T細胞數量降低，其分泌的細胞因子減少，不能持久、廣泛地發(fā)揮其輔助作用，從而參與感染的慢性化。 3．CHC感染者外周血淋巴細胞中CD81高表達同時，CD3+C

9、D4+CD81+T細胞表達水平高于健康對照組。由于CD81既是信號傳導分子又是HCV感染靶細胞受體，所以CD3+CD4+T細胞中CD81的高表達可能參與CD3+CD4+Th細胞功能缺陷，導致無效CD3+CD4+Th細胞，形成免疫枯竭。 4．CHC感染者ALT與AST之間呈正相關，二者均為肝細胞損傷的指標，只是反映肝細胞炎癥程度有所不同。ALT、AST與HCV-RNA含量之間不相關，說明病毒量只是病毒復制的指標，不能反映肝臟的炎癥