慢性丙型肝炎感染者外周血CD81、CD4表達(dá)及臨床意義分析.pdf

1、目的： 深入探討HCV受體CD81及其感染靶細(xì)胞、慢性感染與免疫反應(yīng)、細(xì)胞因子的作用等機(jī)制，在預(yù)防丙型肝炎感染、提高HCV臨床治療水平和監(jiān)測(cè)預(yù)后等方面具有重要意義。本研究采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)55例慢性丙型肝炎感染者和25例健康對(duì)照外周血CD81、CD4的表達(dá)水平，ELISA法檢測(cè)CHC感染者和對(duì)照組血清中自介素2的含量，結(jié)合RT-PCR法檢測(cè)外周血清中HCV-RNA的含量，全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)外周血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)

2、氨酶（AST）含量，分析感染者外周血淋巴細(xì)胞中CD81細(xì)胞和HCV-RNA、CD81淋巴細(xì)胞和CD3+CD4+CD81+T細(xì)胞，兩組中CD3+CD4+T細(xì)胞和IL-2，感染組ALT和AST、HCV-RNA和ALT、AST，ALT、AST分別與CD81+細(xì)胞、CD3+CD4+T細(xì)胞、CD3+CD4+CD81+T細(xì)胞之間的關(guān)系，探討HCV感染后對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的調(diào)變作用及感染慢性化的機(jī)制，并為制定丙型肝炎的防治方案提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

3、 方法： 選取2008年1月到10月在濟(jì)南市傳染病醫(yī)院門診及住院接受治療的CHC患者55例，其中男38例，女17例，平均年齡40歲，均有輸血或輸血制品史，感染史至少在一年以上。慢性HCV感染的診斷符合2000年9月西安中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲病學(xué)分會(huì)、肝病學(xué)分會(huì)聯(lián)合修訂的病毒性肝炎防治方案。根據(jù)為：血清ALT升高、血清抗HCV抗體陽性和HCV-RNA的測(cè)定為>0×103copies/ml。所有病例近3個(gè)月內(nèi)未使用免疫調(diào)節(jié)劑，均無

4、HAV、HBV、HEV或HGV感染，亦未合并其他嚴(yán)重疾病引起的急慢性肝損害。查體中心接受查體的正常健康人群25例，男16例，女9例，平均年齡41歲。分別構(gòu)成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。采用流式細(xì)胞術(shù)三色熒光染色法檢測(cè)慢性丙型肝炎感染者和健康對(duì)照組外周血淋巴細(xì)胞CD81、CD3+CD4+T細(xì)胞、CD3+CD4+CD81+T細(xì)胞的表達(dá)水平。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測(cè)HCV感染者和健康對(duì)照組血清中IL-2的含量。逆轉(zhuǎn)錄酶PCR（RT-PCR）法

5、檢測(cè)HCV感染者血清中HCV-RNA的含量。全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)兩組血清中ALT、AST含量。 結(jié)果： 1．55例CHC感染者外周血淋巴細(xì)胞中CD81分子的表達(dá)水平明顯高于健康對(duì)照組，P<0．01。 2．55例CHC感染者外周血中CD3+CD4+T細(xì)胞的表達(dá)水平明顯低于健康對(duì)照組，P<0．05。 3．55例CHC感染者外周血淋巴細(xì)胞中CD3+CD4+CD81+T細(xì)胞明顯高于健康對(duì)照組，P<0．01。

6、 4．55例CHC感染者血清中IL-2的水平明顯低于健康對(duì)照組，P<0．05。 5．55例CHC感染者，外周血淋巴細(xì)胞中CD81分子的表達(dá)水平與血清中HCV-RNA的含量呈明顯正相關(guān)性r=0．474，P<0．01，與CD3+CD4+CD81+T細(xì)胞呈明顯正相關(guān)，r=0．581，P<0．01；感染者和健康對(duì)照組外周血淋巴細(xì)胞中CD3+CD4+T細(xì)胞的表達(dá)水平與血清中IL-2的水平呈明顯正相關(guān)，r=0．378，P<0．05。CHC

7、感染者血清中ALT與AST之間有明顯的正相關(guān)關(guān)系，r=0．857，P<0．01；ALT、AST和HCV-RNA，ALT、AST與CD81+細(xì)胞、CD3+CD4+T細(xì)胞、CD3+CD4+CD81+T細(xì)胞之間未發(fā)現(xiàn)具有相關(guān)性。 結(jié)論： 1．CHC感染者外周血淋巴細(xì)胞中CD81分子的表達(dá)水平高于健康對(duì)照組，并與HCV-RNA的含量呈正相關(guān)，提示作為HCV感染靶細(xì)胞的受體，HCV的持續(xù)存在促進(jìn)細(xì)胞表面CD81的高表達(dá)。

8、2．CHC感染者外周血中CD81高表達(dá)同時(shí)，CD3+CD4+T細(xì)胞的表達(dá)水平和血清中IL-2的含量明顯低于健康對(duì)照組，且血清中IL-2的水平與外周血淋巴細(xì)胞中CD3+CD4+T細(xì)胞表達(dá)呈正相關(guān)。說明CHC感染者細(xì)胞免疫功能明顯低于健康對(duì)照組。HCV感染發(fā)生后，CD3+CD4+T細(xì)胞數(shù)量降低，其分泌的細(xì)胞因子減少，不能持久、廣泛地發(fā)揮其輔助作用，從而參與感染的慢性化。 3．CHC感染者外周血淋巴細(xì)胞中CD81高表達(dá)同時(shí)，CD3+C

9、D4+CD81+T細(xì)胞表達(dá)水平高于健康對(duì)照組。由于CD81既是信號(hào)傳導(dǎo)分子又是HCV感染靶細(xì)胞受體，所以CD3+CD4+T細(xì)胞中CD81的高表達(dá)可能參與CD3+CD4+Th細(xì)胞功能缺陷，導(dǎo)致無效CD3+CD4+Th細(xì)胞，形成免疫枯竭。 4．CHC感染者ALT與AST之間呈正相關(guān)，二者均為肝細(xì)胞損傷的指標(biāo)，只是反映肝細(xì)胞炎癥程度有所不同。ALT、AST與HCV-RNA含量之間不相關(guān)，說明病毒量只是病毒復(fù)制的指標(biāo)，不能反映肝臟的炎癥