miR-146a通過(guò)靶基因IRAK1對(duì)IL-17的調(diào)控在銀屑病中的研究.pdf

1、第一部分:斑塊狀銀屑病皮損中miR-146a與IL-17的表達(dá)及其相關(guān)性
　　目的:了解斑塊狀銀屑病患者皮損及非皮損區(qū)miR-146a與IL-17 mRNA、TNF-αmRNA、IFN-γ mRNA的表達(dá)情況及其相關(guān)性。
　　方法:通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)19例斑塊狀銀屑病患者皮損區(qū)與非皮損區(qū)miR-146a與IL-17mRNA、TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA表達(dá)。采用PSI評(píng)分對(duì)活檢部位皮損的嚴(yán)重程度進(jìn)行評(píng)估。<

2、br>　　結(jié)果:斑塊狀銀屑病皮損中miR-146a表達(dá)水平（2.31±0.43）高于非皮損區(qū)(1.17±0.24)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=19 P＜0.01)，活動(dòng)期(n=12)與靜止期(n=7)表達(dá)比較無(wú)明顯差異(P＞0.05)，皮損中miR-146a表達(dá)與PSI評(píng)分成正相關(guān)(n=19 r=0.53 P＜0.05)。斑塊狀銀屑病皮損中IL-17 mRNA表達(dá)(3.54±0.83)高于非皮損區(qū)（1.02±0.44），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

3、n=19 P＜0.01)，且活動(dòng)期表達(dá)（n=124.78±1.09）高于靜止期（n=71.43±0.84），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA在皮損區(qū)與非皮損區(qū)表達(dá)無(wú)明顯差異(P＞0.05)，靜止期與活動(dòng)期表達(dá)比較無(wú)明顯差異(P＞0.05)。皮損中miR-146a表達(dá)與皮損中IL-17 mRNA表達(dá)成正相關(guān)(n=19 r=0.0.68 P＜0.01)，與TNF-αmRNA、IFN-γ mRNA

4、表達(dá)無(wú)明顯相關(guān)(P＞0.05)。
　　結(jié)論:miR-146a在斑塊狀銀屑病皮損中升高表達(dá)可反映皮損嚴(yán)重程度，與IL-17 mRNA表達(dá)具有相似性，可能參與了IL-17的調(diào)節(jié)通路。
　　第二部分:斑塊狀銀屑病外周血miR-146a與IL-17的表達(dá)及其相關(guān)性
　　目的:了解斑塊狀銀屑病外周血中miR-146a與IL-17、TNF-α、IFN-γ的表達(dá)情況及其相關(guān)性。
　　方法:收集20例斑塊狀銀屑病患者（12例來(lái)源

5、于切皮患者）和10例正常對(duì)照外周血，通過(guò)ELISA對(duì)血漿中IL-17、TNF-α、IFN-γ的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)外周血PBMC中miR-146a與IL-17 mRNA、TNF-α mRNA、 IFN-γ mRNA的表達(dá)水平。采用PASI評(píng)分對(duì)疾病的嚴(yán)重程度進(jìn)行評(píng)估。
　　結(jié)果:銀屑病患者PBMC中miR-146a表達(dá)（n=202.60±1.02）高于正常對(duì)照(n=100.42±0.07)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜

6、0.05)，但活動(dòng)期(n=10)與靜止期(n=10)比較無(wú)明顯差異(P＞0.05)，活動(dòng)期患者miR-146a表達(dá)與此次病程正相關(guān)(n=10r=0.74 P＜0.05)，PBMC中miR-146a表達(dá)與PASI評(píng)分正相關(guān)(n=20 r=0.67P＜0.01)。銀屑病血漿中IL-17的水平（n=204.41±0.62pg/ml）高于正常對(duì)照（n=102.49±0.18pg/ml），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，且活動(dòng)期(n=105.

7、67±1.09 pg/ml)高于靜止期（n=103.14±0.32pg/ml），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，活動(dòng)期PBMC中IL-17 mRNA表達(dá)水平(n=101.42±0.31)高于靜止期（n=100.34±0.19），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。銀屑病血漿中TNF-α、IFN-γ表達(dá)與正常人比較無(wú)明顯差異(P＞0.05)，靜止期患者血漿TNF-α表達(dá)水平（n=101.31±0.38pg/ml）高于活動(dòng)期（n=100.

8、23±0.12pg/ml），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但TNF-α mRNA水平、IFN-γ、IFN-γ mRNA靜止期與活動(dòng)期比較無(wú)明顯差異(P＞0.05)。PBMC中miR-146a表達(dá)與IL-17蛋白水平正相關(guān)(n=20r=0.78 P＜0.001)，與IL-17 mRNA水平正相關(guān)(n=20 r=0.59 P＜0.01)。外周血PBMC中miR-146a表達(dá)水平（n=452.48±24.15）高于皮損（n=41.89±

9、0.99），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但二者無(wú)相關(guān)性(P＞0.05)。
　　結(jié)論:銀屑病患者外周血PBMC中的miR-146a高表達(dá)，可反映皮損嚴(yán)重程度，在活動(dòng)期可反映疾病的活動(dòng)度，可作為反映疾病嚴(yán)重度及活動(dòng)度的潛在臨床指標(biāo)。miR-146a與IL-17表達(dá)相關(guān)性提示miR-146a可能參與了IL-17的表達(dá)調(diào)控。
　　第三部分:miR-146a靶基因IRAK1在銀屑病皮損與外周血的表達(dá)
　　目的:了解斑塊狀

10、銀屑病皮損及外周血PBMC中miR-146a靶基因IRAK1的表達(dá)特點(diǎn)。
　　方法:qRT-PCR比較6例斑塊狀銀屑病皮損與非皮損區(qū)IRAK1 mRNA表達(dá)，10例正常對(duì)照與12例斑塊狀銀屑病外周血PBMC中IRAK1 mRNA表達(dá)。Western blot比較1對(duì)皮損與非皮損區(qū)IRAK1蛋白水平的表達(dá)，1例正常對(duì)照與4例斑塊狀銀屑病外周血PBMC中IRAK1蛋白水平的表達(dá)。
　　結(jié)果:銀屑病皮損中IRAK1 mRNA表達(dá)（

11、2.18±0.50）高于非皮損區(qū)（0.28±0.2），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=6 P＜0.01)，IRAK1蛋白水平在皮損中表達(dá)高于非皮損區(qū)。銀屑病外周血PBMC中IRAK1 mRNA表達(dá)(n=120.36±0.07)低于正常對(duì)照(n=101.90±0.59)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，IRAK1蛋白水平在銀屑病患者PBMC中較正常人表達(dá)明顯降低。銀屑病皮損及外周血PBMC中IRAK1 mRNA的表達(dá)在靜止期與活動(dòng)期之間無(wú)明顯