MiR-146a、IRAK1基因多態(tài)性和MiR-146a的表達(dá)在類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的意義.pdf

1、目的:有研究顯示類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者(RA)外周血單核細(xì)胞miR-146a表達(dá)增加,靶向抑制腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)和白介素-1受體相關(guān)激酶1(IRAK1)功能障礙可能是RA患者TNF-α增多的重要原因之一。rs2910164位于miR-146a前體(pre-miR-146a)序列上,堿基G>C的突變導(dǎo)致其莖環(huán)區(qū)域G:U到C:U的錯(cuò)配,可能影響成熟miR-146a的表達(dá)。本文探討rs2910164和IRAK1 rs30278

2、98、rs1059703多態(tài)性與中國(guó)中南部地區(qū)漢族人群類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎易感性的關(guān)系,rs2910164多態(tài)性對(duì)miR-146a表達(dá)的影響,以及miR-146a表達(dá)的臨床意義。
　　方法:采用聚合酶鏈反應(yīng)–連接酶檢測(cè)反應(yīng)(PCR–LDR)方法檢測(cè)188例類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者和220例健康對(duì)照者Pre-miR-146a rs2910164和IRAK1 rs3027898、rs1059703位點(diǎn)基因多態(tài)性,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢

3、測(cè)68例RA患者、10例骨關(guān)節(jié)炎(OA)患者及20例健康對(duì)照外周血單個(gè)核細(xì)胞中miR-146a的表達(dá)水平,并選取10例RA疾病活動(dòng)患者給予糖皮質(zhì)激素+非甾體抗炎藥聯(lián)合免疫抑制劑正規(guī)治療3個(gè)月后再次檢測(cè)miR-146a表達(dá)水平。收集并統(tǒng)計(jì)RA患者臨床參數(shù):年齡、性別、發(fā)病年齡、病程、疼痛關(guān)節(jié)數(shù)(TJC)、腫脹關(guān)節(jié)數(shù)(SJC)、VAS評(píng)分、HAQ評(píng)分、DAS28評(píng)分、血沉(ESR)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、RF和抗-CCP抗體滴度、關(guān)節(jié)功能分

4、級(jí)、X線分期。根據(jù)DAS28評(píng)分,病人被分為無(wú)明顯疾病活動(dòng)組(DAS28≤3.2)和疾病活動(dòng)組(DAS28>3.2),后者被分為中度活動(dòng)組(3.25.1),根據(jù)X線分期,病人分為輕度骨破壞組(≤Ⅱ期)和嚴(yán)重骨破壞組(>Ⅱ期)。
　　結(jié)果:①RA組Pre-miR-146a rs2910164和IRAK1 rs3027898、rs1059703位點(diǎn)的基因型頻率和等基因頻率與健康對(duì)照組比較

5、,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。②根據(jù)RF和抗-CCP抗體陰性和陽(yáng)性將RA病人進(jìn)行分組,分組后的4組上述三個(gè)位點(diǎn)位點(diǎn)的基因型頻率和等基因頻率與健康對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。③RA患者rs2910164和rs3027898、rs1059703位點(diǎn)基因型間的發(fā)病年齡、性別、RF和抗CCP抗體陽(yáng)性率、RA疾病活動(dòng)(除了rs3027898)、嚴(yán)重骨破壞均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P>0.05)。④RA患者攜帶rs3027898

6、 CC基因型比CA+AA基因型疾病活動(dòng)增加(P=0.024),多因素非條件Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)RA患者攜帶CC基因型疾病活動(dòng)的風(fēng)險(xiǎn)是攜帶CA+AA基因型2.692倍(P=0.025,OR=2.692,95％CI=1.136～6.380)。⑤在RA患者和健康對(duì)照中,rs2910164多態(tài)性對(duì)miR-146a的表達(dá)無(wú)影響(均 P>0.05)。⑥RA患者組miR-146a的表達(dá)量高于健康對(duì)照組(P=0.000)和OA組(P=0.006

7、),OA組的表達(dá)量和健康對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.823)。⑦健康對(duì)照組和無(wú)明顯疾病活動(dòng)組(DAS28≤3.2)的miR-146a的表達(dá)量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.879);無(wú)明顯疾病活動(dòng)組表達(dá)量低于中度活動(dòng)組(P=0.010)和高度活動(dòng)組(P=0.000),中度活動(dòng)組表達(dá)量低于高度活動(dòng)組(P=0.004)。⑧疾病活動(dòng)RA患者治療后miR-146a表達(dá)量下降(P=0.003)。⑨RA患者miR-146a的表達(dá)量在分別在性別(男性和女性)、

8、病程(≤2年和>2年)、骨破壞(≤Ⅱ期和>Ⅱ期)、RF(陰性和陽(yáng)性)、抗-CCP抗體(陰性和陽(yáng)性)間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P>0.05)。⑩miR-146a表達(dá)量與TJC、SJC、VAS評(píng)分、ESR、CRP、DAS28評(píng)分顯著正相關(guān)(依次r=0.529,P=0.000;r=0.412,P=0.000;r=0.523,P=0.000;r=0.493,P=0.000;r=0.323,P=0.007;r=0.551,P=0.000),與年齡、病程

9、、發(fā)病年齡、關(guān)節(jié)功能分級(jí)、X線分期、HAQ評(píng)分、RF和抗-CCP抗體滴度均無(wú)顯著相關(guān)性(依次r=0.114, P=0.353;r=0.006,P=0.960;r=0.116,P=0.348;r=0.045,P=0.718;r=0.033,P=0.789;r=0.162,P=0.188;r=0.096,P=0.435;r=-1.31,P=0.287)。
　　結(jié)論:我國(guó)中南部地區(qū)漢族人群中,Pre-miR-146a rs2910164