黃羽肉雞實(shí)驗(yàn)性感染火雞組織滴蟲(chóng)的研究.pdf

1、火雞組織滴蟲(chóng)是一種大小不一的多形性原蟲(chóng)，能夠引起禽類(lèi)一種常見(jiàn)寄生蟲(chóng)病:組織滴蟲(chóng)?。ㄓ址Q(chēng)傳染性盲腸肝炎或黑頭病）。該病多發(fā)于火雞和雛雞，珍珠雞、鵪鶉、孔雀中也存在本病的流行，發(fā)病后以盲腸腫脹、腸壁肥厚、內(nèi)有干酪狀的盲腸核心，肝臟出現(xiàn)白色或黃綠色的圓形壞死灶為主要特征。該病往往導(dǎo)致火雞較高的發(fā)病率和死亡率，引起嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，對(duì)養(yǎng)雞業(yè)也會(huì)造成一定的危害。長(zhǎng)期以來(lái)，國(guó)內(nèi)一直缺乏對(duì)該病的系統(tǒng)和詳細(xì)的研究。本研究開(kāi)展了黃羽肉雞實(shí)驗(yàn)性感染火雞組織滴

2、蟲(chóng)的研究，初步探討了該病的致病機(jī)理，為進(jìn)一步研制預(yù)防組織滴蟲(chóng)病的新藥和疫苗奠定了一定的基礎(chǔ)。
　　1.江蘇地區(qū)火雞組織滴蟲(chóng)β-微管蛋白基因的克隆及系統(tǒng)發(fā)育分析
　　為從分子水平了解火雞組織滴蟲(chóng)的分類(lèi)地位與進(jìn)化特征，以江蘇地區(qū)感染火雞組織滴蟲(chóng)發(fā)病雞群的病變肝臟組織為材料，通過(guò)DNA提取、PCR擴(kuò)增、DNA片段的克隆與測(cè)序，獲得了該地區(qū)火雞組織滴蟲(chóng)β-微管蛋白（beta-tubulin）序列，通過(guò)軟件與GenBank收錄的其他地

3、區(qū)火雞組織滴蟲(chóng)和相關(guān)蟲(chóng)體β-微管蛋白基因序列進(jìn)行了系統(tǒng)發(fā)育分析。結(jié)果表明，所獲得的11個(gè)火雞組織滴蟲(chóng)β-微管蛋白基因序列相互之間同源性在95.3％～100.0％之間，親緣關(guān)系較近，與德國(guó)株相似性94.9％以上，與美國(guó)株相似性91.6％以上。同時(shí)，該地區(qū)蟲(chóng)體在基因進(jìn)化過(guò)程中形成2個(gè)大的分枝和多個(gè)小的分枝。研究結(jié)果進(jìn)一步明確了江蘇地區(qū)的火雞組織滴蟲(chóng)存在不同的基因型，需要進(jìn)一步系統(tǒng)研究其分子流行病學(xué)與種群遺傳學(xué)特征。
　　2.兩株火雞組

4、織滴蟲(chóng)分離株對(duì)黃羽肉雞致病力的比較
　　應(yīng)用本實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)的兩株火雞組織滴蟲(chóng)單克隆蟲(chóng)株JSYZ-A株和JSYZ-B株，對(duì)15日齡的蘇禽黃羽肉雞進(jìn)行泄殖腔感染，比較了其致病力的差異。蘇禽黃羽肉雞隨機(jī)分成三組，一組為陰性對(duì)照組，另外兩組分別感染兩株火雞組織滴蟲(chóng)單克隆蟲(chóng)株，感染劑量為105個(gè)蟲(chóng)體/羽。感染后第15天對(duì)雞進(jìn)行撲殺稱(chēng)重，并對(duì)各組雞的發(fā)病率、死亡率、增重、肝臟和盲腸病變計(jì)分進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，比較兩株單克隆蟲(chóng)株的致病力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果

5、表明，不同地區(qū)分離得到的火雞組織滴蟲(chóng)單克隆蟲(chóng)株致病力存在一定差異，單克隆培養(yǎng)的火雞組織滴蟲(chóng)JSYZ-A株的致病力較JSYZ-B株強(qiáng)。
　　3.黃羽肉雞火雞組織滴蟲(chóng)感染后體內(nèi)蟲(chóng)體的動(dòng)態(tài)分布
　　為了研究火雞組織滴蟲(chóng)感染黃羽肉雞后在其內(nèi)的動(dòng)態(tài)分布，將JSYZ-A株蟲(chóng)體通過(guò)泄殖腔感染15日齡蘇禽黃羽肉雞，在感染后7天至31天內(nèi)，每3天撲殺5只感染雞，采集12個(gè)不同組織臟器的樣品，并對(duì)樣品進(jìn)行PCR檢測(cè)和病理學(xué)分析。結(jié)果表明，在感染

6、后7天起，在部分黃羽肉雞的盲腸和肝臟中檢測(cè)到蟲(chóng)體，蟲(chóng)體維持時(shí)間最長(zhǎng)。在心臟、十二指腸、空腸、脾臟、肺臟、法氏囊、腺胃、直腸中，偶爾能夠檢測(cè)到蟲(chóng)體。在胰臟、腦組織中并未檢測(cè)到蟲(chóng)體。肝臟和盲腸病變程度在10-16天時(shí)最高，19天后病變程度減輕。PCR的結(jié)果與病理學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的結(jié)果基本一致。研究結(jié)果顯示火雞組織滴蟲(chóng)主要靶器官為肝臟和盲腸，但其并非單一感染盲腸和肝臟，而是會(huì)侵染機(jī)體的各個(gè)組織，其感染的具體路徑還有待于進(jìn)一步研究。
　　4.黃

7、羽肉雞火雞組織滴蟲(chóng)感染后生理及生化指標(biāo)動(dòng)態(tài)變化
　　為了進(jìn)一步探究火雞組織滴蟲(chóng)致病機(jī)理，通過(guò)應(yīng)用本實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)的JSYZ-A株蟲(chóng)體通過(guò)泄殖腔感染15日齡蘇禽黃羽肉雞，并設(shè)空白對(duì)照組。在感染后7天至31天內(nèi)，每3天撲殺5只感染雞和對(duì)照雞，采取非抗凝血進(jìn)行生化指標(biāo)檢測(cè)，同時(shí)進(jìn)行體重稱(chēng)重。研究發(fā)現(xiàn)，火雞組織滴蟲(chóng)的感染會(huì)導(dǎo)致感染雞體重減輕。導(dǎo)致機(jī)體的一系列生化指標(biāo)出現(xiàn)紊亂，如:谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶、球蛋白、尿素濃度上升