重組人瘦素對慢性特發(fā)性血小板減少性紫癜（CITP）患者骨髓巨核細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：ITP是一種慢性獲得性自身免疫性疾病，其特點是患者體內(nèi)產(chǎn)生抗血小板抗體，導(dǎo)致網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)破壞自身血小板。ITP的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，一般認(rèn)為其發(fā)病機(jī)理主要為免疫因素導(dǎo)致血小板破壞過多，但血小板生成還與巨核細(xì)胞的正常凋亡密切相關(guān)，對于疾病過程中巨核細(xì)胞及其造血功能改變的研究尚不足。瘦素是一種對造血及免疫細(xì)胞發(fā)揮重要作用的因子，CITP患者血清瘦素水平升高，與血小板計數(shù)呈負(fù)相關(guān)，與血小板相關(guān)抗體IgG呈正相關(guān)，本研究旨在明確瘦素對CITP胃

2、髓巨核細(xì)胞是否有影響。 方法：以急性巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞株M07e和CITP骨髓CD34+細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化的巨核細(xì)胞為研究對象。運用RT-PCR檢測MO7e細(xì)胞瘦素受體mRNA表達(dá)，運用Brdu-ELISA法檢測瘦素對M07e細(xì)胞的增殖作用，運用Annexin V/PI雙標(biāo)流式檢測瘦素對M07e細(xì)胞的凋亡作用。經(jīng)TPO、SCF誘導(dǎo)磁珠分選后獲得的CITP骨髓CD34+細(xì)胞分化為巨核細(xì)胞，運用流式測定瘦素對其分化過程中CD41a+、C

3、D61+的表達(dá)以及CD41a+細(xì)胞的凋亡是否有影響。 結(jié)果：瘦素受體長型Ob-RL和短型Ob-RS在M07e細(xì)胞均有mRNA表達(dá)。瘦素對M07e細(xì)胞的增殖有促進(jìn)作用，并呈現(xiàn)一定的劑量依賴性，濃度為5ng/ml即顯示出促增殖效應(yīng)(p=0.037)，但濃度在5、10、25ng/ml之間無明顯統(tǒng)計學(xué)差異，濃度為100ng/ml時其增殖效應(yīng)最大。在時間依賴效應(yīng)上，瘦素作用48h，其細(xì)胞增殖明顯高于24h，而作用72h其細(xì)胞增殖介于兩者之

4、間(p=0.000)。瘦素對M07e細(xì)胞具有抑制凋亡作用(p=0.001)，而且在作用72小時后凋亡率最高。瘦素對骨髓CD34+細(xì)胞分化為巨核細(xì)胞過程中CD41a+、CD61+表達(dá)的影響，與不加瘦素組相比無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。對CD41a+細(xì)胞凋亡的影響與不加瘦素組相比亦無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。 結(jié)論：瘦素通過促進(jìn)MO7e細(xì)胞的增殖，抑制其凋亡來參與巨核細(xì)胞自血病的發(fā)生、發(fā)展。瘦素在TPO+SCF誘導(dǎo)CIT