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1、為了研究磷酸烯醇式丙酮酸激酶(PEPCK)啟動子片段在肝細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用,該課題主要進(jìn)行了以下工作:首先,構(gòu)建及鑒定熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒pGL2-PEPECK-Luc.隨后,通過脂質(zhì)體(Lipofectin)轉(zhuǎn)染法將構(gòu)建的報(bào)告質(zhì)粒與內(nèi)對照質(zhì)粒pSV-β-Galactosidase共同轉(zhuǎn)染大鼠肝腫瘤細(xì)胞系(CBRH7919),以不含任何啟動子的pGL2-Basic-Luc質(zhì)粒作為熒光素酶表達(dá)活性對照,設(shè)定背景熒光強(qiáng)度為1.最后,研究PEP
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