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1、溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文慢病毒介導(dǎo)的自殺基因?qū)渫粻罴?xì)胞的殺傷作用姓名:陳瑾申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師:俞康20121117ThesuicidegenelentivirusmediatediskillingofdendriticcellsAbstractubjective:ExplorelentivirusthymidinekinasemediatedkillingofdendriticcellsinmouseLentivir
2、alvectorplasmidconstructcontainingsuicidegeneTK,stableandefficienttransfectionefficiency,transfecteddendriticcellsbyganciclovirsuicidegeneisactivatedtheeelldeathMethods:1、LemiviralpackagingcellT293importthetargetgenefrag
3、mentcomainingthesuicidegenelentivirus,thenculturedviruscollectionanddetenninationoflentiviraltiter2、Basedonthecultivationofdendriticcells,maketheribonucleoproteinfunctionlentivirusintodendriticcells,andthroughtheobservat
4、ionfluorescencemicroscopefluorescentquantitytodeterminetransfectionefficiency,usingflowcytometryinstrumentdetectionGFPrate3、Wewillcommitsuicidegenetransfercells,nontoxicprodrugGCV(ganciclovir)phosphorylation,thenincellsu
5、ndertheactionofinsidekinasefinalphosphorylationforthreephosphateGCV(GCVTP)toxicitysubstances,reverseintoDNAsynthesischain,leadtoDNAsynthesischainsuspension,chromOSOmedegenerationandsisterchromatidexchange,eventuallyleadi
6、ngtocelldeathResults:1、Throughthelentiviruspackaging,collectcontainssuicidegeneslowvirus,andmeasuringthedropdegreeis2e9tu/ml,achievetherequirementofexperiment2、Lentiviraltransfecteddendriticcells,andobservedmorphologyofd
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