MBD1-mdr1信號(hào)轉(zhuǎn)錄調(diào)控胰腺癌多藥耐藥性的實(shí)驗(yàn)研究及其臨床意義.pdf

1、本文對(duì)MBD1/mdr1信號(hào)轉(zhuǎn)錄調(diào)控胰腺癌多藥耐藥性及其臨床意義進(jìn)行了探討。本研究利用RNA干擾技術(shù)，設(shè)計(jì)合成了針對(duì)MBDl基因的siRRAs，成功構(gòu)建MBDlsiRNAs真核表達(dá)質(zhì)粒RotroSuper-MBDl$iRNAs，并成功載入質(zhì)粒．采用脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法將MBDl$iRNAs表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染胰腺癌細(xì)胞系BxPC-3，成功下調(diào)了BxPC-3細(xì)胞株MBD1基因表達(dá)水平。應(yīng)用免疫組化定量分析法、FQ-PCR技術(shù)、MSP方法及MTT比色法

2、檢測(cè)BxPC-3細(xì)胞在調(diào)控前后mdr1/P-gP在蛋白水平、基因表達(dá)水平、基因甲基化程度以及腫瘤細(xì)胞增殖能力變化。結(jié)果表明：胰腺癌中P-gp與mdr1 mKNA表達(dá)呈顯著一致，與mdr1基因轉(zhuǎn)錄區(qū)域結(jié)合位點(diǎn)甲基化表達(dá)程度也呈顯著相關(guān)；當(dāng)胰腺癌細(xì)胞株BxPC-3通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)方法轉(zhuǎn)染MBDlsiRNAs表達(dá)質(zhì)粒后，M BD1的表達(dá)受到有效抑制，改變了mdr1/P-gP在蛋白水平、mRNA水平和基因甲基化的表達(dá)，影響了腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的耐藥能