Mdr1反義寡核苷酸聯(lián)合磁性載藥微球逆轉(zhuǎn)胰腺癌耐藥實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中文摘要刖舌目 錄第一部分 S W l 9 9 0 ／F u 耐藥株細(xì)胞的建立材料與方法結(jié)果討論5第二部分 輻射促磁性載藥微球聯(lián)合反義寡核苷酸對(duì)S W l 9 9 0 ／F u 的耐藥逆轉(zhuǎn)( 一) M T T 法檢測(cè)半數(shù)抑制量( i c ∞)材料與方法結(jié)果( 二) P C R 分析s w l 9 9 0 ／F u 細(xì)胞m d r 。的m R N A 變化材料與方法 ???一?一??一?一?一一一結(jié)果 一一一一～???????一一一( 三

2、) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)s w l 9 9 0 ／F u 細(xì)胞表面P —g P 陽(yáng)性率材料與方法結(jié)果討論1 41 8— 2 1第三部分 磁性載藥微球聯(lián)合反義寡核苷酸對(duì)人胰腺癌裸鼠模型的療效觀察材料與方法 ??一一??一?一一一一一一一結(jié)果 一一?一一一一?一一??一一一t 寸論 一～?一一??一?一一?～一一參考文獻(xiàn) 一??一一?????一一?一一英文摘要 一一一一一?一一?????一一致謝 一?一一???一一?????一略縮詞表 一一一?一

3、一一一????一一一?一8O49l452333444貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院 碩士研究生畢業(yè)論文M d r 。反義寡核苷酸聯(lián)合磁性載藥微球逆轉(zhuǎn)胰腺癌耐藥實(shí)驗(yàn)研究研究生：權(quán)廣前 導(dǎo)師： 孫誠(chéng)誼教授潘耀振教授摘 要目的：在人胰腺癌耐藥細(xì)胞株( S W l 9 9 0 ／F u ) 構(gòu)建的基礎(chǔ)上，通過(guò)探討輻射促細(xì)胞轉(zhuǎn)染的多藥耐藥( m u l t i d r u gr e s i s t a n c e ，M D R ) 基因m d r 。反義寡核苷酸(

4、A S o N )逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞S W l 9 9 0 ／F u 的耐藥效果，此外在磁導(dǎo)下聯(lián)合新型化療藥物磁性載藥微球( P E G 一5 一M A M S ) 治療裸鼠人胰腺癌，觀察其逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥的治療效果。方法：采用M T T 方法比較陽(yáng)性脂質(zhì)體介導(dǎo)的m d r ，反義寡核苷酸( A S o N ) 直接轉(zhuǎn)染與聯(lián)合輻射轉(zhuǎn)染的情況下耐藥細(xì)胞株S W l 9 9 0 ／F u 對(duì)磁性載藥微球( P E G 一5 一M A M S ) 的半

5、數(shù)抑制量( I C 。。) ，同時(shí)利用酶聚鏈反應(yīng)R T - P C R 方法和流式細(xì)胞儀檢測(cè)兩種不同的轉(zhuǎn)染方法對(duì)S W l 9 9 0 ／F u 細(xì)胞的m d r 。一m R N A 及其表達(dá)產(chǎn)物P 一糖蛋白( P - g p ) 的調(diào)控情況，通過(guò)構(gòu)建裸鼠人胰腺癌耐藥腫瘤模型基礎(chǔ)上，腫瘤局部以2 G y 6 0 C oY 輻射，瘤內(nèi)注射陽(yáng)性脂質(zhì)體介導(dǎo)的m d r 。反義寡核苷酸( A S o N ) ，經(jīng)磁導(dǎo)下利用磁性載藥微球( P E

6、 G 一5 一M A M S ) 聯(lián)合化療。結(jié)果：M T T 實(shí)驗(yàn)表明：聯(lián)合輻射介導(dǎo)的陽(yáng)性脂質(zhì)體A S O N 使S W l 9 9 0 ／F u 對(duì)磁性載藥微球( P E G 一5 一M A M S ) 的I C 軸實(shí)驗(yàn)表明，聯(lián)合輻射的陽(yáng)性脂質(zhì)體介導(dǎo)的A S O N 使S W l 9 9 0 ／F u 的I C ∞從處理前的3 8 ．1 6 ±1 ．2 2 u g ／m l 降至處理后的6 ．7 3 ±0 ．5 6

7、u g ／m l ，而單純輻射組的I C 。。僅降至3 7 ．9 7 ±1 ．3 6 u g ／m l ，實(shí)驗(yàn)表明聯(lián)合輻射轉(zhuǎn)染組的逆轉(zhuǎn)療效明顯優(yōu)于單純輻射組( 尸以0 1 ) 。反轉(zhuǎn)錄R T —P C R 和流式細(xì)胞儀的結(jié)果顯示，聯(lián)合輻射的陽(yáng)性脂質(zhì)體介導(dǎo)A S O N 組的S W l 9 9 0 ／F u 細(xì)胞m d r 。一m R N A 的表達(dá)水平及細(xì)胞膜糖蛋白( P —g P ) 的陽(yáng)性率均明顯低于反義寡核苷酸( A S