白癜風患者血清中單純皰疹病毒及抗體的檢測.pdf

1、前言：
　　 白癜風是一種后天獲得的色素脫失性疾病。白癜風的發(fā)病機制包括自身免疫學說、黑素細胞自毀學說、神經(jīng)化學因子學說、遺傳學說等。臨床上通常分為五型,即散發(fā)型、泛發(fā)型、節(jié)段型、局限型及面部/肢端型。近年來,Verson在試驗中發(fā)現(xiàn)皰疹病毒與白癜風有一定關系,即皰疹病毒可能是白癜風發(fā)病的一個刺激因素;Grimes等也現(xiàn)38%的白癜風標本(12/29)存在巨細胞病毒DNA,但是并沒有檢測到單純皰疹病毒、水痘帶狀皰疹病毒及人嗜T淋

2、巴細胞病毒的DNA;Ailoglu等檢測血清中人皰疹病毒6的IgG抗體,發(fā)現(xiàn)白癜風組比對照組的陽性率高。目前還沒有報告明確指出單純皰疹病毒和白癜風的關系,但是注射了單純皰疹疫苗的小雞(Smyth Line Chicken)患自身免疫白癜風的比例較高。
　　 單純疹病毒為嗜神經(jīng)病毒,能夠在神經(jīng)內(nèi)潛伏,機體免疫力低下時,皰疹病毒復制,侵襲神經(jīng)引起單純皰疹。單純皰疹病毒也可以引起多形紅斑。多形紅斑是一種自限性炎癥反應性疾病,皮損主要分

3、布于手足及粘膜等處。實驗證明HSVDNA存在于多形紅斑的皮損中。面部肢端型白癜風是一種特殊類型的白癜風,皮損分布與多形紅斑相似,所以我們推測HSV可能作為這兩種疾病的始發(fā)因素,通過免疫機制或臨床病理學反應侵襲了不同的靶位(角蛋白或黑素細胞)。為了驗證這個假設,我們利用PCR技術檢測血清中的HSVDNA,HSV陽性說明患者處于單純皰疹感染期。同時用化學發(fā)光法檢測白癜風患者和對照組血清中的HSV抗體。
　　 材料和方法：
　　

4、 一、實驗材料
　　 (一)病例與標本
　　 于中國醫(yī)科大學皮膚科門診(2009年～2010年)收集臨床確診的白癜風患者90例,其中42例男性,48例女性,年齡為4-70歲。病程為半個月到19年,包括泛發(fā)型2例,節(jié)段型6例,局限型7例,散發(fā)型50例,面部肢端型25例。其中急性期79例,穩(wěn)定期11例。90例中23例有白癜風家族史。724例育齡期女性的HSV抗體結(jié)果作為陰性對照。5例急性期的單純皰疹患者(2例生殖器皰疹,3

5、例面部皰疹)做為陽性對照。
　　 90例白癜風患者均采取5毫升外周血,血清分離出來,儲存于-80℃冰箱里,用來檢測單純皰疹病毒1/2型-抗體及其血清中的單純皰疹病毒DNA。同時采取5例單純皰疹患者的皮損,提取其中的DNA以備用。
　　 (二)主要試劑
　　 1、DNA提取試劑盒(TIANampVirusDNA/RNAKit,離心柱型,版本號RP090326,目錄號DP315);
　　 2、LIAISON@

6、HSV-1/2IgG,產(chǎn)品編號310800,生產(chǎn)批號075049;
　　 3、LIAISON@HSV-1/2IgM,產(chǎn)品編號310820,生產(chǎn)批號077044/1;
　　 4、PremixExTaqHotStartVersion(TaKaRaCode:DRR030A);
　　 5、DL500DNAMarker(TaKaRaCode:D525A);
　　 6、REGULARAGAROSEG-10(LOTNO

7、:111860;ORIGIN;SPAIN)。
　　 二、實驗方法
　　 PCR技術(polymerasechainreaction)檢測白癜風血清中的單純皰疹皰疹病毒DNA,及用化學發(fā)光法檢測血清中單純皰疹病毒抗體。
　　 結(jié)果：
　　 90例白癜風患者血清中均未檢測到HSVDNA,5例單純皰疹患者血清中未檢測到HSVDNA,其中3例皮損中檢測到HSVDNA。
　　 90例白癜風患者中2例(2.2