腦腫瘤干細胞的培養(yǎng)鑒定及其不同位點的特性和放射敏感性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、鄭州大學碩士學位論文腦腫瘤干細胞的培養(yǎng)鑒定及其不同位點的特性和放射敏感性研究姓名:趙中甫申請學位級別:碩士專業(yè):神經(jīng)外科指導教師:楊波20070528鄭州大學2007屆碩士研究生學位論文《掩愛)腦腫瘤干細胞的培養(yǎng)鑒定及其不同位點的特性和放射敏感性研究腦腫瘤干細胞學說【2】認為,腦膠質(zhì)瘤內(nèi)存在與神經(jīng)干細胞性質(zhì)相似的細胞,它們可能參與了腦腫瘤形成。這些細胞在體外可形成神經(jīng)球,能夠自我更新,有異常的增殖能力,且具有多分化潛能,在一定環(huán)境中可分

2、化成神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞,細胞比例與原腫瘤相似。這些細胞是腦腫瘤中一小部分表達人類干細胞標志物CDl33()的細胞即腦腫瘤干細胞(braintumorstemcell,BTSC)。將這種細胞注射入小鼠顱內(nèi),可在活體內(nèi)產(chǎn)生與原腫瘤類似的腫瘤,重復操作又可以在另一只小鼠體內(nèi)產(chǎn)生表型相似的腫瘤。結合上述學說和臨床實際應用,進行本實驗設計。在腦膠質(zhì)瘤中分離,培養(yǎng)及鑒定BTSC,觀察腦腫瘤于細胞的生長特性,為腦腫瘤干細胞的進一步研究打下基礎;探討膠質(zhì)

3、瘤個體化定位化的治療方案。材料與方法:術中取腦膠質(zhì)瘤中5個位點的腫瘤細胞,接種于含生長因子的無血清培養(yǎng)基中,使其中的腦腫瘤干細胞增殖:利用細胞免疫熒光法檢測腦腫瘤干細胞CDl33和Nestin的表達;用MTT法、流式細胞術檢測膠質(zhì)瘤中不同位點的細胞增殖;用2Gy、3Gy、5GY、8Gy、12Gy、15GyX線劑量照射細胞活力最強位點的腫瘤干細胞。用統(tǒng)計軟件SPSS100處理數(shù)據(jù),利用方差分析(OneMayANOVA)來檢驗不同位點指標問

4、或不同x線照射后指標間有無統(tǒng)計學意義,利用最小顯著差法(LSD)進行多重比較。結果;從膠質(zhì)瘤中提取的細胞能在無血清培養(yǎng)基中存活并懸浮生長,并增殖形成克隆性細胞球,傳代后腫瘤細胞球仍保持很強的自我更新和增殖能力;體外培養(yǎng)中,腦腫瘤干細胞表達特異性的標志物CDl33和Nestin;膠質(zhì)瘤中不同部位的腫瘤細胞增殖活力有差異;8Gy以上x線劑量對腦腫瘤干細胞具有顯著的殺傷作用。結論:膠質(zhì)瘤組織中存在腦腫瘤干細胞,并能在體外將其分離、培養(yǎng);腦腫瘤

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