乳腺導管內(nèi)乳頭狀腫瘤中Ezrin、Ki-67、P63及CK34βE12的表達研究.pdf

1、目的：乳腺導管內(nèi)乳頭狀腫瘤包括一組病變：良性乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤及導管內(nèi)乳頭狀癌。由于三者的分子生物學基礎、預后及臨床處理存在較大差異，有必要準確區(qū)分三者。當病變不典型時往往存在鑒別診斷困難的情況，尤其是良性乳頭狀瘤同非典型乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤同導管內(nèi)乳頭狀癌的鑒別診斷。從形態(tài)上鑒別這兩組疾病往往帶有一定的主觀性，并造成這兩組疾病診斷重復性很差；而病理診斷的準確性直接影響手術方式的選擇，手術方式對以上疾病的預后又有直接影響。隨著

2、分子生物學的飛速進展和各種高新生物技術的不斷涌現(xiàn)，腫瘤標志物的研究已成為當今醫(yī)學界研究的焦點。因而尋找可靠和實用的腫瘤標志物進行輔助診斷，早期發(fā)現(xiàn)癌變傾向，彌補形態(tài)學方面的缺憾，可減少因治療不足導致的后期癌變率。根據(jù)乳腺導管內(nèi)良性乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤及導管內(nèi)乳頭狀癌臨床診斷和鑒別診斷中的實際問題，本研究采用免疫組化非生物素兩步法fTM法、)聯(lián)合檢測乳腺導管內(nèi)良性乳頭狀瘤，非典型乳頭狀瘤及乳頭狀癌中Ki-67抗原、EZrin蛋白、34

3、βE12角蛋白及P63等在蛋白水平上的表達情況，分析其表達與乳腺導管內(nèi)良性乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤及導管內(nèi)乳頭狀癌之間的相關性，探討Ezrin、Ki-67、P63及34βE12作為腫瘤標記物在乳腺導管內(nèi)乳頭狀腫瘤良惡性病變鑒別診斷中的價值。 材料與方法：收集邢臺市腫瘤醫(yī)院，金能集團總醫(yī)院及邢臺市第三醫(yī)院2001年10月-2006年10月手術切除的3596例乳腺腫瘤，按照2003年WHO新的乳腺腫瘤與遺傳學分類標準，從中挑選出導管

4、內(nèi)良性乳頭狀瘤30例，非典型乳頭狀瘤28例，導管內(nèi)乳頭狀癌26例，均為石蠟包埋組織，共84例。所有病例術前均未行放、化療及免疫治療，臨床資料完整，并均經(jīng)病理組織學確診。采用免疫組化非生物素兩步法(TM法)聯(lián)合檢測腫瘤組織中Ezrin、Ki67、P63及34βE12在蛋白水平上的表達情況，分析其臨床病理意義，特別是在腫瘤鑒別診斷中的意義。 結(jié)果 1．Ezrin在各種乳腺導管乳頭狀腫瘤中的表達情況 Ezrin蛋白陽性

5、反應位于腫瘤細胞膜或/和細胞漿，呈棕黃色顆粒。30例良性導管內(nèi)乳頭狀瘤中，25例Ezrin呈單純細胞膜著色，另外5例除細胞膜陽性著色外，還可見少量細胞漿陽性著色；28例導管非典型乳頭狀瘤中，15例呈單純細胞膜陽性著色，13例為細胞膜和細胞漿共同著色。而在26例導管內(nèi)乳頭狀癌中14例。Ezrin陽性反應定位于細胞漿，核膜著色不明顯。在良性乳頭狀瘤組、非典型乳頭狀瘤組、導管內(nèi)乳頭狀癌組中Ezrin細胞漿的陽性異常表達率分別為3.3％、32.

6、1％和53.8％。從良性乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤到導管內(nèi)乳頭狀癌．Ezrin細胞漿的陽性異常表達呈逐步遞增趨勢，導管內(nèi)乳頭狀癌組中Ezrin細胞漿的異常表達率明顯高于良性和非典型導管內(nèi)乳頭狀瘤組(P<0.05)。Ezrin在細胞漿中的陽性異常表達提示其可能參與了乳腺導管乳頭狀腫瘤的癌變過程，可作為乳腺導管乳頭狀腫瘤良惡性質(zhì)鑒別診斷的標記物。 2．Ki-67在各種乳腺導管乳頭狀腫瘤中的表達情況 Ki-67陽性免疫反應產(chǎn)物呈

7、棕黃色顆粒狀，定位于乳腺導管乳頭狀腫瘤細胞的細胞核。良性導管內(nèi)乳頭狀瘤組、非典型乳頭狀瘤組和導管內(nèi)乳頭狀癌組Ki67的陽性異常表達率分別為20.0％、42.9％和73.1％。從良性導管內(nèi)乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤到導管內(nèi)乳頭狀癌Ki67的陽性異常表達呈逐步遞增趨勢，導管內(nèi)乳頭狀癌組中Ki67的陽性異常表達率明顯高于良性導管內(nèi)乳頭狀瘤組和非典型乳頭狀瘤組(P<0.05)。 本研究結(jié)果表明，Ki67可以反映乳腺導管乳頭狀腫瘤的增殖程度

8、和生物學行為，在各類乳腺導管內(nèi)乳頭狀腫瘤的鑒別診斷中具有一定參考價值。 3．P63在各種乳腺導管乳頭狀腫瘤中的表達情況 P63定位于乳腺肌上皮細胞核，陽性染色為細胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。在30例乳腺良性乳頭狀瘤腺體周圍可見P63陽性表達的肌上皮，呈連續(xù)性分布，核著色程度強。而在28例乳腺非典型乳頭狀瘤及26例導管內(nèi)乳頭狀癌的腺體周圍，肌上皮細胞數(shù)目減少呈間斷或不連續(xù)環(huán)狀，且核著色程度弱。P63在良性乳頭狀瘤組、非典型性乳頭

9、狀瘤組和導管內(nèi)乳頭狀癌組中異常表達率分別為10.0％、39.3％、88.5％。P63在導管內(nèi)乳頭狀癌組中的異常表達率較之良性導管內(nèi)乳頭狀瘤組與非典型乳頭狀瘤組明顯增高(P<0.05)。綜上研究結(jié)果提示：P63可以作為乳腺導管內(nèi)乳頭狀腫瘤良惡性鑒別診斷的一種良性病變標記物。 4．34βE12角蛋白在各種乳腺導管乳頭狀腫瘤中的表達情況 34βE12主要定位于乳腺導管乳頭狀腫瘤細胞膜，陽性染色為細胞膜及部分細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆

10、粒。34βE12在良性導管內(nèi)乳頭狀瘤中主要表現(xiàn)為完整的細胞膜強陽性表達，細胞質(zhì)有少量陽性表達；在導管內(nèi)乳頭狀癌細胞的表達，則表現(xiàn)以細胞質(zhì)內(nèi)見陽性顆粒為主，較少見完整的細胞膜陽性，而且陽性強度也較良性病變明顯減弱；在導管內(nèi)非典型乳頭狀瘤中的表達情況則界于二者之間。34βE12在良性乳頭狀瘤組、非典型乳頭狀瘤組和導管內(nèi)乳頭狀癌組中異常表達率分別為16.7％、53.6％、96.2％。在導管內(nèi)乳頭狀癌中的異常表達率較之良性導管內(nèi)乳頭狀瘤組與非典

11、型乳頭狀瘤組明顯增高(P<0.05)。本研究結(jié)果顯示，上皮細胞出現(xiàn)34βE12顯著異常表達時高度提示為癌。 5．乳腺導管內(nèi)乳頭狀腫瘤Ezrin、Ki-67、34βE12與P63表達的關系 Spearman等級相關分析結(jié)果表明，Ezrin與Ki-67在乳腺導管內(nèi)乳頭狀腫瘤中的表達呈正相關。34βE12與P63在乳腺導管內(nèi)乳頭狀腫瘤中的表達呈正相關。 結(jié)論 1、Ezrin在乳腺導管內(nèi)良性乳頭狀瘤、非典型乳頭狀

12、瘤和乳頭狀癌細胞中的異常表達呈逐步遞增趨勢，提示其可能參與了乳腺導管乳頭狀腫瘤的癌變過程，可作為乳腺導管乳頭狀腫瘤良惡性質(zhì)鑒別診斷的標記物。 2、從導管內(nèi)良性乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤到導管內(nèi)乳頭狀癌Ki67的異常表達呈逐步遞增趨勢，表明Ki67可以反映乳腺導管乳頭狀腫瘤的增殖程度和生物學行為，在各類乳腺導管內(nèi)乳頭狀腫瘤的鑒別診斷中具有一定的參考價值。 3、乳腺良性乳頭狀瘤腺體周圍均可見連續(xù)性分布P63強陽性表達的肌上皮細