開放式壓力控制培養(yǎng)系統(tǒng)下壓力對人眼小梁細胞自分泌轉(zhuǎn)化生長因子-β-,2-的影響.pdf

1、[目的]采用自行設(shè)計組裝的新型細胞培養(yǎng)加壓實驗?zāi)Ｐ汀_放式壓力控制培養(yǎng)系統(tǒng)，研究壓力作用水平及作用時間對體外培養(yǎng)的人眼小梁細胞自分泌轉(zhuǎn)化生長因子-β2(transforminggrowthfactor—beta2，TGF-β2)的影響，并且探討TGF-β2在原發(fā)開角型青光眼發(fā)病機制中的影響。 [方法]采用組織塊培養(yǎng)法體外培養(yǎng)人眼小梁細胞，傳代至第5代用于本實驗。根據(jù)動態(tài)循環(huán)氣體控制壓力的原理對細胞加壓，對照組細胞不施加壓力(0

2、mmHg)，實驗組細胞分別施加20、40、60和80mmHg壓力，各組細胞在不同壓力水平下分別于開放式壓力控制系統(tǒng)中持續(xù)培養(yǎng)0、12、24、36h。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附(enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)法測定各組細胞培養(yǎng)基上清液中TGF-β2濃度。 [結(jié)果]實驗組小梁細胞自分泌TGF-β2水平隨壓力增高而增高，與對照組比較，差異有顯著性意義(P＜0.05)；在20～60mmHg壓

3、力范圍內(nèi)，加壓培養(yǎng)持續(xù)時間越長，TGF-β2水平升高越明顯(P＜0.05)，其中40mmHg壓力水平下培養(yǎng)36h組的小梁細胞分泌TGF-β2水平最高(1305.36±105.33pg·ml-1)；雖然在80mmHg壓力水平下，TGF-β2水平升高幅度下降，但加壓培養(yǎng)12和24h組細胞分泌的TGF-β2水平仍明顯高于對照組(P＜0.05)。 [結(jié)論]在開放式壓力控制培養(yǎng)系統(tǒng)中，隨著壓力水平的增高，在細胞可耐受范圍內(nèi)，小梁細胞自分泌