轉(zhuǎn)化生長因子β2對人晶狀體上皮細胞產(chǎn)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及凋亡的影響.pdf

1、目的：
　　人晶狀體上皮細胞(HLEC)的凋亡是大多數(shù)白內(nèi)障的共同病理生理學原因，本研究觀察不同濃度的轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)對體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細胞發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress，ER stress）以及凋亡的影響，為進一步研究白內(nèi)障發(fā)生的機制及其防治提供依據(jù)。
　　方法：
　　對永生系HLEC系SRA01/04進行培養(yǎng)及傳代，按照不同的TGF-β2濃度分為4組:

2、A(0ng/l，即空白對照組)、B組(100ng/l)、C組(200ng/l)、D組(500ng/l)，培養(yǎng)48h后采用MTT法檢測細胞存活率;采用免疫印跡分析(Western Blot)檢測凋亡相關(guān)蛋白casepase-3以及ER stress標志性分子GRP78和Hrd1的表達量的變化。
　　結(jié)果：
　　1.A（空白對照組）、B100ng/l、C200ng/l、D500ng/l不同濃度的TGF-β2作用后，OD值分別為0

3、.527±0.015，0.461±0.011，0.354±0.019，0.338±0.022，SR值分別為100％，80.66％，61.97％，59.22％，與A組細胞比較，BCD各組OD值與SR值均下降，其差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)
　　2.Western blot檢測casepase-3的表達
　　各組casepase-3的表達(casepase-3與β-actin比值)分別為0.1263±0.0217，0.29

4、05±0.0974,0.5164±0.1024,0.8434±0.1677。
　　3.Western blot檢測GRP78的表達
　　TGF-β2作用后，各組中GRP78表達(GRP78與β-actin比值)分別為0.1463±0.0783、0.3074±0.1172、0.7520±0.2741、0.8419±0.3334。
　　4.Western blot檢測Hrd1的表達
　　TGF-β2作用后，各組中Hr

5、 d1表達分別為0.6233±0.1459、0.4025±0.1201、0.2587±0.0868、0.2051±0.1584。
　　與A組細胞比較，BCD各組caspase-3和GRP78的表達升高，Hrd1的表達降低，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，其變化與細胞存活率的降低相吻合，提示晶狀體上皮細胞已誘發(fā)了ER stress并且產(chǎn)生凋亡，且嚴重程度隨TGF-β2的濃度增加而增強。
　　結(jié)論：
　　1.TGF-