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1、南方醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文激光激發(fā)5-氨基乙酰丙酸己酯選擇性殺傷人紅白血病細胞株姓名:盧曉珣申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):內(nèi)科學(xué)(血液?。┲笇?dǎo)教師:郭坤元20080424中文摘要多藥耐藥細胞株K 5 6 2 /A D M 和人正常臍血單個核細胞( c o r db l o o dm o n o n u l c e a rc e l l ,C B M C ) 的殺傷效應(yīng)。探討H e .A L A .P D T 是否具備有效殺傷多藥耐藥白血病細胞而
2、不影響正常造血干細胞的功能;篩選出H e .A L A .P D T 殺傷白血病細胞的最佳光動力作用條件;并進一步探討白血病細胞的死亡方式。為清除白血病細胞,及下一步將H e .A L A .P D T 應(yīng)用于自體造血干細胞移植的移植物體外凈化,降低移植復(fù)方率方面提供實驗依據(jù)。方法第一章激光激發(fā)5 .氨基乙酰丙酸己酯選擇性殺傷人多藥耐藥白血病細胞株K 5 6 2 /A D M 與親本細胞株K 5 6 2 的光動力作用條件研究比較不同濃度
3、的米托蒽醌、柔紅霉素對K 5 6 2 、K 5 6 2 /A D M 細胞殺傷效果的異同。細胞分4 組:光動力( P D T ) 組( a n 光敏劑又接受光照) 、激光組( 不加光敏劑只接受光照) 、暗毒性組( 只加光敏劑而不接受光照) 、正常對照組( 不加光敏劑又不接受光照) 。用不同濃度( O .0 2 5 、0 .1 、O .4 、1 .6 m m o l /L ) 的H e .A L A 避光孵育細胞,然后給予6 3 0 n
4、m 波長的不同功率密度( 4 .5 、9 、1 8 、3 6 J /c m 2 ) 的激光照射后,繼續(xù)培養(yǎng)1 2 h ,再測定細胞存活率。比較單一因素( 激光或光敏劑) 和聯(lián)合因素( 激光+ 光敏劑) 對白血病細胞殺傷效果的異同;‘觀察光動力作用各組細胞形態(tài)學(xué)改變;并篩選出最佳的光動力作用條件;在所篩選的條件下,探討光動力作用對入正常臍血單個核細胞( C o r d b l o o d m o n o n u c l e a r c e
5、 l l ,C B M C ) 的殺傷作用。第二章激光激發(fā)5 .氨基乙酰丙酸己酯對人多藥耐藥白血病細胞株K 5 6 2 /A D M與親本細胞株K 5 6 2 的體外殺傷研究細胞分為P D T 組和正常對照組,以第一章篩選的光動力作用條件作用于K 5 6 2 、K 5 6 2 /A D M 細胞。瑞氏染色觀察光動力作用后白血病細胞形態(tài)學(xué)變化;流式細胞儀檢測K 5 6 2 、K 5 6 2 /A D M 細胞內(nèi)光敏劑的熒光強度;采用甲基纖
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