運(yùn)用nestin-EGFP轉(zhuǎn)基因小鼠研究腦和胰腺中nestin陽性細(xì)胞的體外增殖分化潛能.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文運(yùn)用nestinEGFP轉(zhuǎn)基因小鼠研究腦和胰腺中nestin陽性細(xì)胞的體外增殖分化潛能姓名：王曉靜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：生理學(xué)指導(dǎo)教師：張衡鄧宏魁20040430山東大學(xué)博士學(xué)位論文運(yùn)用nestinEGFP轉(zhuǎn)基因小鼠研究腦和胰腺中nestin陽性細(xì)胞的體外增殖分化潛能中文摘要背景：近年來，干細(xì)胞的研究成為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn)，引起了廣大研究者的關(guān)注，是因?yàn)橛诩?xì)胞的研究為一些長久困擾人們的醫(yī)學(xué)難題和頑癥提供了治療新

2、思路。有些成體干細(xì)胞的研究比較深入，如造血干細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞；有的剛剛開始，如胰腺干細(xì)胞、皮膚干細(xì)胞、肝干細(xì)胞等?？偟膩碚f現(xiàn)在干細(xì)胞的研究還處于初級(jí)階段，還有許多問題沒有解決：干細(xì)胞由于缺乏特異性的標(biāo)記，其分離純化還未有好的解決方法；體外培養(yǎng)體系的建立還不完善；干細(xì)胞的增殖、分化的確切分子機(jī)制尚不清楚；目前誘導(dǎo)干細(xì)胞向某些表達(dá)特異標(biāo)記的細(xì)胞分化，尚未找到成熟的方法等等。此外，干細(xì)胞研究與胚胎的倫理地位、克隆人等若干問題也有著極為密切的關(guān)

3、系。目的：本課題旨在通過建立細(xì)胞內(nèi)源蛋白nestin的啟動(dòng)子，增強(qiáng)子所驅(qū)動(dòng)的報(bào)告基因EGFP表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠，經(jīng)過流式細(xì)胞儀分選出腦和胰腺中nestin陽性細(xì)胞，在體外檢測腦來源的nestin陽性細(xì)胞是否具有神經(jīng)干細(xì)胞的增殖分化潛能，能否代表神經(jīng)干細(xì)胞群體：胰腺來源的nestin陽性細(xì)胞是否是胰腺的干細(xì)胞，是否具有干細(xì)胞的特性。這為神經(jīng)干細(xì)胞的分離純化提供一種可行有效的方法，并為胰腺干細(xì)胞的初步研究提供一套簡便可靠的體外分離、培養(yǎng)、誘導(dǎo)