不同年齡階段大鼠正中隆起Nestin和Sox2陽(yáng)性細(xì)胞的觀(guān)察.pdf

1、目的:觀(guān)察出生后不同發(fā)育階段大鼠正中隆起Nestin和Sox2陽(yáng)性細(xì)胞的分布和形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。
　　方法:雄性健康SD大鼠，青年組（8周齡）和成年組（24周齡）各12只，共24只。麻醉后，經(jīng)心臟灌注4％多聚甲醛磷酸緩沖液(0.1mol/L，pH7.2)。其中取青年組和成年組各6只，常規(guī)脫水、浸蠟、包埋，切片后，用免疫組化檢測(cè)正中隆起處Nestin的表達(dá)，另取青年組和成年組各6只，常規(guī)脫水、浸蠟、包埋，切片后，用免疫組化檢測(cè)正中隆起

2、處Sox2的表達(dá)。
　　1、標(biāo)本制備:將正常組用水合氯醛(0.3ml/100g)麻醉后，自主動(dòng)脈灌注4％多聚甲醛磷酸鹽緩沖液(0.1 mol/L，PH7.2)進(jìn)行前固定，立即取腦，后固定，經(jīng)脫水，透明，包埋，選取含正中隆起部分，石蠟切片機(jī)冠狀面切片，厚度約為5μm，制成石蠟切片。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處置符合動(dòng)物倫理學(xué)要求。
　　2、免疫組織化學(xué)染色:將上述石蠟切片分別經(jīng)Nestin和Sox2免疫組織化學(xué)染色，蘇木精復(fù)染后，使用中性樹(shù)

3、膠封片后，用Olympus BX-UCB觀(guān)察照相。
　　3、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:同一倍數(shù)的照片，各選取相同長(zhǎng)度室管膜層和相同深度，統(tǒng)計(jì)相同面積下陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，計(jì)算陽(yáng)性率。
　　結(jié)果:
　　1、Nestin免疫組織化學(xué)結(jié)果觀(guān)察:Nestin免疫陽(yáng)性細(xì)胞在ME處明顯表達(dá)，在青年組ME室管膜帶和內(nèi)帶的中央部呈強(qiáng)陽(yáng)性分布，在成年組ME室管膜和內(nèi)帶的中央部、外側(cè)部都呈強(qiáng)陽(yáng)性分布，基突由背側(cè)向腹側(cè)走行，止于外帶的軟膜下或血管壁周?chē)Ｇ嗄杲M陽(yáng)

4、性細(xì)胞表達(dá)率35.51±1.88％，成年組陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率57.63±4.90％。兩組有明顯差異，P＜0.01。
　　2、Sox2免疫組織化學(xué)結(jié)果觀(guān)察:Sox2免疫陽(yáng)性細(xì)胞在ME室管膜帶單層整齊分布，青年組ME的外側(cè)部呈強(qiáng)陽(yáng)性，成年組ME少量、弱陽(yáng)性分布。青年組陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率44.30±3.50％，成年組陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)率31.40±4.03％，兩組有明細(xì)差異，P＜0.01。
　　結(jié)論:
　　1、Nestin免疫陽(yáng)性細(xì)胞主要