血漿RASSF1A和p16基因高甲基化對非小細胞肺癌的診斷價值.pdf

1、鄭州大學博士學位論文血漿RASSF1A和p16基因高甲基化對非小細胞肺癌的診斷價值姓名：劉桂芝申請學位級別：博士專業(yè)：流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學指導教師：吳逸明吳衛(wèi)東20070527鄭卅人學2007JIf；博I：學位論文中義摘要改變又能確胡巾癌患者的血漿游離DNA中槍測到，且Jf』L漿游離DNA能夠較好的反應肺癌組織中兩基因甲基化狀念，那么，聯(lián)合檢測血漿游離DNA中兩基因CpG島甲基化將有利于肺癌的早期珍斷。RASSFIA的抑癌機制尚不清楚。借

2、助比較蛋白質組學研究方法，可以觀察RASSFlA失活后引起的效應和調節(jié)蛋白的變化，更加深入了解RASSFlA的作用和探討抑癌機制。目的1檢測中國人非小細胞肺癌(non—smallcelllungcancerNSCLC)組織中RASSFlA和p16基因失活和啟動子CpG島高甲基化情況，探明兩基因在NSCLC中失活的主要機制；分析NSCLC患者血漿游離DNA中RASSFlA和p16基因啟動子CpG島高甲基化與癌組織中兩基因甲基化的相關性，探

3、索聯(lián)合檢測血漿中兩基因異常甲基化用于NSCLC診斷的價值。2建立RASSFlA表達或表達缺失的兩類不同肺腺癌組織中蛋白質雙向電泳凝膠圖譜，并從中篩選差異顯示蛋白質點，質譜鑒定出差異顯示蛋白，通過差顯蛋白功能分析，為進一步研究RASSFlA的抑癌途徑奠定初步基礎。材料與方法1研究對象與分組以96例NSCLC患者的癌組織和血漿為研究對象，以相匹配的遠癌正常肺組織、12例肺良性病變患者和20例健康志愿者的血漿為對照。2研究方法21NSCLC組

4、織中RASSFlA和p16基因表達失活情況研究211RASSFlA和p16基因轉錄觀察從NSCLC組織和相配的遠癌正常肺組織中提取總RNA逆轉錄合成eDNA，以此eDNA為模板PCR擴增RASSFlA和p16基因片斷，觀察兩基因的轉錄情況。結合病人的臨床資料和腫瘤病理特征分析，卡方檢驗比較兩基因轉錄失活與NSCLC患者臨床資料和腫瘤病理特征的關系。212RASSFlA表達觀察從NSCLC組織和相配的遠癌正常肺組織中提取總蛋白，BradF