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1、該實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建能夠滅活I(lǐng)P<,3>的人磷酸酶IP<,3>P表達(dá)基因,建立CNE2穩(wěn)定過表達(dá)IP<,3>P的細(xì)胞系,分析IP<,3>是否參與了U50488H(KOR特異性激動(dòng)劑)調(diào)節(jié)CNE2細(xì)胞系的增殖和凋亡.同時(shí)為了探討DAG的作用也建立了DAG激酶(DGKε)穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系.實(shí)驗(yàn)還觀察了U50488H對(duì)人HERG基因編碼的I<,Kr>的調(diào)節(jié)作用,以及雌激素對(duì)CNE2細(xì)胞KORmRNA表達(dá)的調(diào)節(jié).結(jié)論:1、成功構(gòu)建了人IP<,3>P基因
2、表達(dá)載體并建立了CNE2-IP<,3>P穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系.2、U50488H能夠抑制細(xì)胞CNE2的生長(zhǎng)和增殖,且具有濃度依賴性.3、U50488H對(duì)CNE2細(xì)胞的早期作用是使細(xì)胞線粒體膜電位值減小.4、PLC/IP<,3>是U50488H抑制CNE2細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的重要信號(hào)傳導(dǎo)通路.5、成功建立了DOS7-DGKε穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系.6、建立了HEK293-HERG穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系.7、U50488H能夠劑量依賴性地抑制HERG基因編碼的I<,
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