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1、該實驗通過構(gòu)建能夠滅活I(lǐng)P<,3>的人磷酸酶IP<,3>P表達基因,建立CNE2穩(wěn)定過表達IP<,3>P的細胞系,分析IP<,3>是否參與了U50488H(KOR特異性激動劑)調(diào)節(jié)CNE2細胞系的增殖和凋亡.同時為了探討DAG的作用也建立了DAG激酶(DGKε)穩(wěn)定表達細胞系.實驗還觀察了U50488H對人HERG基因編碼的I<,Kr>的調(diào)節(jié)作用,以及雌激素對CNE2細胞KORmRNA表達的調(diào)節(jié).結(jié)論:1、成功構(gòu)建了人IP<,3>P基因
2、表達載體并建立了CNE2-IP<,3>P穩(wěn)定表達細胞系.2、U50488H能夠抑制細胞CNE2的生長和增殖,且具有濃度依賴性.3、U50488H對CNE2細胞的早期作用是使細胞線粒體膜電位值減小.4、PLC/IP<,3>是U50488H抑制CNE2細胞生長和增殖的重要信號傳導(dǎo)通路.5、成功建立了DOS7-DGKε穩(wěn)定表達細胞系.6、建立了HEK293-HERG穩(wěn)定表達細胞系.7、U50488H能夠劑量依賴性地抑制HERG基因編碼的I<,
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