人乳頭瘤病毒18E6在成釉細(xì)胞瘤中檢測意義的初探.pdf

1、目的：成釉細(xì)胞瘤(ameloblastoma，AB)是最常見的牙源性腫瘤，呈局部浸潤性破壞，屬于良性腫瘤，容易復(fù)發(fā)，但是遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移極為罕見。在組織學(xué)上，AB分為濾泡型、叢狀型、顆粒細(xì)胞型，促結(jié)締組織增生型等。AB的發(fā)病機(jī)理尚未明確。人乳頭瘤病毒(human papillomaviruses，HPV)是一種DNA病毒，約8000bp，無包膜。HPV易感染粘膜和復(fù)層鱗狀上皮，分為高危型和低危型。低危型包括HPV-6和HPV-11，主要導(dǎo)致良性

2、病損的發(fā)生，包括大部分的病毒性性傳播性疾病。高危型有HPV-16、HPV-18、HPV-31等，常導(dǎo)致惡性腫瘤的發(fā)生，包括宮頸癌和頭頸部腫瘤。HPV致癌中心環(huán)節(jié)是HPV16和18的轉(zhuǎn)化蛋白E6，E6能與宿主細(xì)胞p53腫瘤抑制蛋白結(jié)合，從而引起p53降解。因?yàn)閜53具有調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和腫瘤抑制功能，p53功能的喪失將會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞周期紊亂，有利于突變、染色體不穩(wěn)定及宿主基因組癌變的發(fā)生。 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化、PCR、Western Bl

3、ot等方法對人AB中HPV18E6的DNA和蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測，探討HPV18E6與人AB生物學(xué)行為的相關(guān)性和在該腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起到的作用。 材料與方法 1、免疫組化 中國醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院和第一臨床醫(yī)學(xué)院1987年至2005年存檔蠟塊，重新制作切片HE染色并復(fù)閱。正?？谇徽衬?Normal oral mucosa，NOM)5例，良性AB 45例，惡性AB5例。病理分型：濾泡型22例，叢狀型13例，單囊型5例，

4、顆粒細(xì)胞亞型1例，促結(jié)締組織增生型2例，外周型2例。 2、Westem blot印記分析冰凍組織標(biāo)本為2004-2006年凍存標(biāo)本，NOM 2例，AB 18例。組織學(xué)分型：濾泡型2例，叢狀型7例，棘皮瘤型2例，基底細(xì)胞型2例，促結(jié)締組織增生型2例，單囊型3例。 3、PCR 冰凍組織標(biāo)本為2004-2005年凍存標(biāo)本，NOM11例，AB 12例。病理分型：濾泡型1例，叢狀型5例，棘皮瘤型2例，基底細(xì)胞型1例，促結(jié)締

5、組織增生型1例，單囊型2例。 結(jié)果 1、免疫組化 HPV18E6蛋白表達(dá)在良性AB的星網(wǎng)狀層和外周層細(xì)胞胞漿和胞核中，表達(dá)陽性率為46.67％(21/45)，其中核、漿陽性為3例，漿陽性18例，兩例外周型AB表達(dá)陰性。HPV18E6蛋白在1例惡性AB中為核強(qiáng)陽性表達(dá)，陽性率為20％(1/5)，正常粘膜表達(dá)陰性，與AB的表達(dá)具有顯著性差異(X<'2>=4.023，P<0.05)，良性AB與惡性AB之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意

6、義。 2、Western Blot在18例AB中HPV18E6全部為陽性表達(dá)，陽性率100％(18/18)，2例正常粘膜與免疫組化檢測結(jié)果一樣均表達(dá)陰性。AB與正常粘膜中HPV18E6的表達(dá)差異顯著(F=4.670，P<0.05)。 3、PCR 檢測12例AB和11例正常粘膜，12例AB中HPV18E6DNA陽性率為58.33％(7/12)，11例正常粘膜中HPV18E6DNA陽性率為18.18％(2/11)。A