Wnt1在成釉細胞瘤中的表達和意義.pdf

1、目的:
　　 成釉細胞瘤（ameloblastomas ABs）是發(fā)生于頜骨內(nèi)的牙源性上皮來源的腫瘤，在國內(nèi)其發(fā)生率約占牙源性腫瘤的60％。腫瘤內(nèi)主要含成釉器樣結構，但無釉質(zhì)或其他牙體硬組織形成。大多數(shù)腫瘤發(fā)生于頜骨內(nèi)，常導致頜骨的膨大和面部變形。雖屬良性腫瘤，但其生長具有局部侵襲性，術后復發(fā)率較高，也有惡變甚至遠處轉(zhuǎn)移的少量報道。WHO2005年新分類將ABs分為4種臨床病理行為不同的變異型，包括：實性／多囊型、骨外／外周型、

2、促結締組織增生型和單囊型。這些亞型在患者年齡、部位、影像學表現(xiàn)以及臨床預后等方面均存在差異，以往對于其治療多采用刮除術，由于其復發(fā)機率較大，所以目前多以擴大切除術為主，但仍有小部分患者有復發(fā)傾向。鑒于本病至今沒有有效的治療方法，因此研究其發(fā)病機制，尋找抑制腫瘤新的靶點，對預防和治療本病有著較重要的意義。目前對ABs有較多的研究，對其分子生物學方面發(fā)病機制的探討也不斷有報道，由于其是與牙齒發(fā)育有關的腫瘤，而Wnt信號通路又是牙齒發(fā)育過程中

3、所必不可少的信號調(diào)節(jié)通路，因此推測此通路可能與ABs發(fā)生有一定相關性。Wnt1屬于信號轉(zhuǎn)導蛋白家族19分泌的蛋白，其有促進細胞增殖的作用。以往已證實了Wnt1參與胚胎的發(fā)育和牙齒的發(fā)生，研究發(fā)現(xiàn)Wnt通路的異常誘導了腫瘤的發(fā)生，原因是Wnt1活化，使β-catenin非磷酸化進入細胞核，激活經(jīng)典Wnt通路，誘導了細胞增殖，而細胞凋亡停止，因此產(chǎn)生了異常的新生物。但在成釉細胞瘤的患者中發(fā)生少于20％。
　　 因此本實驗擴大樣本量，

4、檢測Wnt1基因在成釉細胞瘤中的表達，探討成釉細胞瘤發(fā)生發(fā)展中細胞凋亡的作用及其與成釉細胞瘤臨床生物學行為的關系。
　　 方法:
　　 實驗標本來自2007年至2010年中國醫(yī)科大學口腔醫(yī)院外科和病理科，新鮮手術標本-86℃凍存。診斷標準依WHO2005分類標準。采取免疫組化SP法、Western-blot法和實時定量PCR(Real-time PCR)法分別檢測ABs中Wnt1蛋白的表達。
　　 結果:

5、　　 一、ABs中Wnt1免疫組化結果
　　 Wnt1在ABs中有胞漿的異位表達，以中度陽性強陽性為主，位于ABs的外周層及星網(wǎng)狀層細胞漿中，胞漿陽性為90.0％(71/80)，正?？谇火つど掀ぜ毎麩o表達，在口腔鱗狀細胞癌(SCC)、牙源性角化囊性瘤(KCOT)均呈陽性表達。
　　 二、ABs中Wnt1蛋白表達結果
　　 用Western-blot方法，以β-tublin做內(nèi)參，檢測了30例ABs中Wnt1表達

6、情況。結果顯示，Wnt1在ABs(0.86±0.24)中的表達明顯高于正常黏膜(0.61±0.04)中的表達，具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但在ABs和牙源性角化囊性瘤(KCOT)(0.80±0.06)組織中的表達無明顯差別（P＞0.05）。
　　 三、ABs中Wnt1基因mRNA表達結果
　　 用Real-time PCR方法，以β-actin做內(nèi)參，檢測了30例ABs中Wnt1的mRNA表達情況。結果顯示ABs中W