hpv人乳頭瘤病毒_第1頁
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1、HPV人乳頭瘤病毒,客服中心陳杰,目錄,宮頸癌篩查,宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤,也是嚴(yán)重影響婦女身心健康,威脅婦女生命的重要原因之一。但它也是唯一病因明確,唯一可以早發(fā)現(xiàn)早治療,唯一可望消滅的疾病。所以我們只要提前篩查和預(yù)防,大可不必過多擔(dān)心。而TCT和HPV聯(lián)合檢測能百分之百防止漏診,HPV病毒學(xué)基本知識,1小環(huán)狀雙鏈DNA病毒2直徑50~55nm3無脂蛋白膜4由核酸和蛋白衣殼組成5癌基因E6E7,HPV分型,Lorem

2、ipsum dolor sit amet, consectetur adipisicing elit.,HPV分型,6、11型與尖銳濕疣關(guān)系最密切HPV2、27、57可引起手足部尋常疣HPV56、59-64、67、71均在外陰上皮內(nèi)增生的病損中測到HPV16、18、31、33、35、型與外陰部原位鱗癌、鮑溫樣丘疹病及Queyrat增生性紅斑有關(guān)。,HPV感染方式,一種是HPV藏在人的基底細胞內(nèi),這種情況可能持續(xù)數(shù)十年,而不被臨床所

3、用的方法檢測到,不管高危型HPV或是低危型HPV都有這種形式,可以復(fù)制但不引起病變。HPV游離在它感染的上皮細胞里,跟人的DNA沒有整合,同樣高危型HPV和低危型HPV都有這種狀態(tài)。整合型,HPV DNA環(huán)在E2、E1基因處斷開,并與人DNA整合,一般是高危型HPV 感染。,生殖道HPV感染,高危型HPV通常沒有癥狀,為一過性并可自愈。90%以上的病人兩年內(nèi)可痊愈常見其他亞型繼發(fā)或者合并感染——多重HPV亞型合并感染極為常見自然

4、免疫力差——感染后只有50%-60%的女性產(chǎn)生HPV抗體,因此對同種基因型的HPV可再度感染!,A,細胞學(xué)檢查,B,感染組織中HPV蛋白的檢測,C,HPV感染的血清學(xué)檢查,D,HPV基因組檢測,HPV的檢測方法,A 、細胞學(xué)檢查,傳統(tǒng)巴氏涂片(CVC)液基薄層細胞學(xué)技術(shù)(TCT)自動細胞學(xué)檢測系統(tǒng)test(LCT)計算機輔助細胞檢測系統(tǒng)(CCT)優(yōu)點:操作簡單,價格低廉,適宜做初步篩查缺點:凹空細胞是HPV感染的主要形態(tài)學(xué)改變

5、,但由于其他病毒感染及人為因素都有可能造成細胞內(nèi)出現(xiàn)空泡或凹空樣病變,而且細胞檢查易受取材、染色及細胞病理醫(yī)生的主觀判斷等因素影響。因此存在靈敏度低、特異性差、假陽性和假陰性率高、不能對HPV進行分型等問題,A 、細胞學(xué)檢查,TCT檢查是采用液基薄層細胞檢測系統(tǒng)檢測宮頸細胞并進行細胞學(xué)分類診斷,它是目前國際上較先進的一種宮頸癌細胞學(xué)檢查技術(shù),與傳統(tǒng)的宮頸刮片巴氏涂片檢查相比明顯提高了標(biāo)本的滿意度及宮頸異常細胞檢出率。TCT宮頸防癌細胞學(xué)

6、檢查對宮頸癌細胞的檢出率為100%,同時還能發(fā)現(xiàn)部分癌前病變,微生物感染如霉菌、滴蟲、病毒、衣原體等。所以TCT技術(shù)是應(yīng)用于婦女宮頸癌篩查的一項先進的技術(shù)。,B 、感染組織中HPV蛋白的檢測,針對HPV抗原,主要是衣殼蛋白制備抗體,通過免疫學(xué)方法進行檢測,ELISA,免疫沉淀法等。優(yōu)點:原理明確,操作簡單缺點:由于HPV不能體外培養(yǎng),且其免疫原性較弱,故免疫學(xué)檢測靈敏度較低,C 、HPV感染的血清學(xué)檢查,通過免疫學(xué)方法檢測血清中是否

7、存在針對HPV產(chǎn)生的抗體優(yōu)點:原理明確,操作簡單缺點:由于人體對HPV產(chǎn)生免疫應(yīng)答有一定的遲滯性,所以血清學(xué)檢測對無免疫應(yīng)答或者HPV潛伏期患者會產(chǎn)生漏檢。,D 、HPV的DNA檢測技術(shù),① 聚合酶鏈反應(yīng)(PCR, Polymerase Chain Reaction):擴增位于兩段已知序列之間的DNA片斷的方法。該法有較高的敏感度,可進行HPV分型,缺點是對實驗室環(huán)境要求較高,容易發(fā)生樣本間的交叉污染,從而導(dǎo)致假陽性率高。② 核酸

8、雜交檢測有較好的特異性和敏感度,還可以進行HPV DNA的分型,各種核酸雜交檢測方法有一定的優(yōu)缺點。,D 、HPV的DNA檢測技術(shù),核酸印跡原位雜交 適用于HPV分型和HPV DNA分子量鑒定,雖然靈敏度高,但因操作復(fù)雜,需要新鮮組織標(biāo)本,不便在臨床上大規(guī)模使用。斑點印跡 其敏感度和特異性均低于核酸印跡原位雜交法,雖然經(jīng)濟實用,但實驗過程存在有放射性污染,是環(huán)保所不能輕視的問題。原位雜交(in situ hybridization

9、) 一種核酸雜交技術(shù),可用來測定基因或特定核苷酸序列在核酸分子的所在部位,檢測重組體DNA) 通過非放射性探針對石蠟組織進行檢測,能作定位檢測,假陽性率低,但靈敏度不高,大大降低了臨床使用價值。,D 、HPV的DNA檢測技術(shù),D雜交捕獲法(Hybrid Capture)  雜交捕獲試驗是利用化學(xué)發(fā)光對抗體捕獲的信號加以放大。首先使DNA雙鏈釋放并分解成為可以雜交的核苷酸單鏈,DNA單鏈與RNA組合探針結(jié)合為RNA-DNA雜合體,特異性

10、抗體將RNA-DNA雜合體捕獲,偶聯(lián)有堿性磷酸酶的第二抗體與RNA-DNA雜合體結(jié)合,堿性磷酸酶使酶底物發(fā)光,根據(jù)光的強弱可確定堿性磷酸酶的含量,從而確定RNA-DNA雜合體的含量。能檢測13種高危型HPV,包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68。,HPV的DNA檢測技術(shù),高,HPV基因分型檢測,人乳頭瘤病毒基因分型檢測采用PCR-反向點雜交法,使用自行設(shè)計的HPV基因組中的特異性引物,對

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