家蠶生物反應(yīng)器研究——轉(zhuǎn)hGM-CSF基因家蠶及桿狀病毒表達(dá)SARS-CoV M基因.pdf_第1頁(yè)
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1、桑蠶生物反應(yīng)器主要有兩種形式;轉(zhuǎn)基因桑蠶(transgenicsilkworm)和桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)(BaculovirusExpressionVectorSystem,BEVS)?! ”疚膶⒂杉倚Q核型多角體病毒(BmNPV)IE-1基因啟動(dòng)子及其控制下的hGM-CSF基因克隆到PigA3GFP中,構(gòu)建了家蠶轉(zhuǎn)基因載體PigA3GFP[IE-GMCSF],利用壓力滲透法和精子介導(dǎo)法將此載體與其輔助質(zhì)粒helper-pigA3導(dǎo)入家蠶

2、,獲得了發(fā)綠色熒光的家蠶。提取家蠶基因組DNA用PCR法可檢測(cè)hGM-CSF基因,推測(cè)hGM-CSF基因已整合進(jìn)家蠶的染色體,對(duì)G3代轉(zhuǎn)基因家蠶用ELISA進(jìn)行hGM-CSF的活性測(cè)定,結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因家蠶凍干粉中hGM-CSF的量為95ng/100mg?! ×硗?,本文將SARS病毒的M蛋白完整基因克隆進(jìn)原核表達(dá)載體pET28a(+),在大腸桿菌BL21中誘導(dǎo)表達(dá),分析表明大腸桿菌中表達(dá)的重組M蛋白的分子量為28KD,與理論值相符,此外

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