血紅素氧合酶-1對哮喘大鼠氣道炎癥及IL-10的影響.pdf

1、目的：通過建立大鼠哮喘模型，研究HO-1 表達的變化對哮喘氣道炎癥的影響，分析HO-1 與IL-10 在哮喘發(fā)生、發(fā)展中的關系及作用，探討HO-1 在哮喘中的免疫調抑作用機制。 方法： 取4 周齡雄性SD 大鼠，第一天用10％卵清蛋白（Ovalbumin,OVA）混懸液1ml（含10％氫氧化鋁、滅活百日咳桿菌）腹腔注射致敏、2 周后超聲霧化吸入2％ OVA 激發(fā)，復制哮喘動物模型；設置不同干預組，在每次激發(fā)前分別用血晶素

2、（Hemin）、鋅-原卟啉（Zinc protoporphyrin- IX, ZnPP）或地塞米松（DXM）干預處理，末次激發(fā)24 小時后麻醉處死大鼠，取激發(fā)后各組動物支氣管肺泡灌洗液（BALF）及肺組織，分別測定BALF 中細胞總數(shù)和嗜酸性粒細胞（EOS）百分比，用免疫組織化學法測定肺組織HO-1 的變化，ELISA 法測定BALF 上清液中IL-10 的量，并分析HO-1 與IL-10 之間的相關性，結合肺組織病理學檢測分析氣道炎癥

3、狀況。 結果： 1. 哮喘模型的建立：與對照組相比，模型組大鼠出現(xiàn)了明顯的呼吸窘迫癥狀： 呼吸急促、輔助呼吸肌收縮、青紫等表現(xiàn)。肺組織病理學顯示氣道周圍明顯炎癥改變、BALF 細胞學顯示EOS 百分比明顯增加（P<0.01），提示哮喘大鼠模型復制成功。經Hemin、DXM 干預后，大鼠激發(fā)后癥狀較模型組明顯改善；而ZnPP 組則與模型組無顯著差異。 2. 病理組織學：模型組、Hemin 組、ZnPP 組和DXM

4、組氣道組織均可見EOS等炎癥細胞浸潤，但Hemin 組、DXM 組氣道炎癥明顯輕于模型組和ZnPP組。 3. BALF 細胞學檢測：Hemin 組、DXM 組細胞總數(shù)及EOS 百分比明顯低于模型組和ZnPP 組（P<0.05）；Hemin 組和DXM 組、及模型組和ZnPP 組兩間細胞總數(shù)及EOS 百分比則差異無顯著意義（P>0.05）。 4. 免疫組織化學顯示：模型組HO-1 表達較對照組增高（P<0.01），對照組僅

5、有少量表達；與模型組相比，經Hemin、DXM 處理后HO-1 表達明顯增加（P<0.01），Hemin 組和DXM 組兩組間比較差異無顯著意義（P>0.05）；ZnPP組與模型組兩組間比較HO-1 表達差異無顯著意義（P >0.05）。HO-1 陽性細胞主要定位于巨噬細胞、氣道上皮細胞，平滑肌細胞也可見表達。 5. IL-10 量：致敏、激發(fā)后模型組BALF 上清液中IL-10 表達較對照組明顯減低（P<0.05）；但經Hem

6、in、DXM 處理后IL-10 含量明顯高于模型組（P<0.01），Hemin 組和DXM 組差異無顯著意義（P>0.05）；而ZnPP 組與模型組IL-10量差異無顯著性（P>0.05）。 6. 模型組、Hemin 組、ZnPP 組和DXM 組的HO-1 表達量與IL-10 量的變化方向相同；Spearman 相關系數(shù)為r =0.718，P<0.01（雙側），說明HO-1 表達量與IL-10 含量之間有高度正相關的直線相關關系

7、。 結論： 1. 卵蛋白（OVA）與免疫佐劑氫氧化鋁、滅活百日咳桿菌致敏、激發(fā)能夠成功復制哮喘大鼠模型。 2. 支氣管哮喘大鼠肺組織HO-1 蛋白表達明顯增加。 3. HO-1 陽性細胞主要定位于肺巨噬細胞、氣道上皮細胞。 4. HO-1 激動劑Hemin、及地塞米松（DXM）均可上調HO-1 的表達。 5. HO-1 表達上調能顯著抑制過敏性氣道炎癥。 6. Hemin 與地塞米