褪黑素對小鼠缺血再灌注腦損傷后海馬CA3區(qū)的保護作用.pdf

1、目的：觀察褪黑素（Melatonin，MT）對缺血再灌注腦損傷小鼠行為學(xué)及海馬CA3區(qū)神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化，探討MT對缺血再灌注腦損傷小鼠的神經(jīng)保護作用。
　　方法：隨機將60只健康小鼠分為假手術(shù)組，模型7d組和模型治療7d組。模型組采用雙側(cè)頸總動脈夾閉法建立小鼠缺血再灌注腦損傷，模型治療組分別于處死前3天腹腔注射MT（20mg/kg，3次/天），假手術(shù)組同時給予等量生理鹽水。各組小鼠于處死前3天采用Y-型迷宮檢測小鼠學(xué)習(xí)

2、記憶能力，于行為檢測完畢后行腦組織超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD)、一氧化氮（NO）、丙二醛(Maleic dialdehyde，MDA)及腦組織含水量檢測；透射電鏡下觀察海馬CA3區(qū)神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化。利用免疫組織化學(xué)和蛋白印跡技術(shù)，探討各組小鼠海馬CA3區(qū)神經(jīng)元特異性烯醇化酶（Neuron specific enolase，NSE）、膠質(zhì)原纖維酸性蛋白（Glial Fibrillary

3、Acidic Portein，GFAP）、半胱氨酸蛋白水解酶-2、3（caspase-2、3）蛋白表達的變化。
　　結(jié)果：⑴與模型組相比，MT治療組小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力明顯改善（P<0.05）；⑵MT治療組SOD含量顯著升高，NO、MDA含量明顯下降；⑶電鏡下，MT治療組較非治療組海馬神經(jīng)元的損傷明顯改善。⑷免疫組化染色顯示治療型組小鼠海馬CA3區(qū)NSE陽性細(xì)胞較模型組明顯增多（P<0.05），陽性反應(yīng)產(chǎn)物平均光密度增高（P<0.0

4、5），同時蛋白印跡結(jié)果顯示經(jīng)治療MT后小鼠海馬CA3區(qū)NSE蛋白含量增多（P<0.05）；⑸免疫組化染色顯示治療型組小鼠海馬CA3區(qū)GFAP陽性細(xì)胞較模型組明顯減少（P<0.05），陽性反應(yīng)產(chǎn)物平均光密度降低（P<0.05），同時蛋白印跡結(jié)果顯示MT治療組小鼠海馬CA3區(qū)GFAP蛋白含量降低（P<0.05）；⑹免疫組化染色顯示治療型組小鼠海馬CA3區(qū)caspase-2、3陽性細(xì)胞較模型組明顯減少（P<0.05），陽性反應(yīng)產(chǎn)物平均光密度降