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1、目的:本實(shí)驗(yàn)采用大鼠盲腸結(jié)扎穿孔致膿毒癥模型,動(dòng)態(tài)觀察膿毒癥大鼠早期肝臟細(xì)胞功能變化與肝臟血管內(nèi)皮細(xì)胞損害情況,初步探討兩者是否具有一定的相關(guān)性及其可能機(jī)理。
方法:SD大鼠66只,雌雄不拘,隨機(jī)分為3組:(1)正常對(duì)照組(n=6),動(dòng)物于麻醉后,稱重,經(jīng)腹主動(dòng)脈采血,采用酶聯(lián)免疫分析法檢測(cè)血清鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT),血清可溶性E-選擇素(sE-selectin),腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平。大鼠處死,采取少許
2、肝竇組織行電鏡觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)損傷情況,用電子秤稱量肝臟濕重,于80℃烤箱留存48h后,稱量肝臟干重。并計(jì)算肝水含量;(2)假手術(shù)組(n=30),動(dòng)物麻醉后行盲腸探查術(shù)后關(guān)閉腹腔,分別于術(shù)后3,6,12,24和48h五時(shí)點(diǎn)行與正常對(duì)照組相同的操作步驟,每時(shí)相點(diǎn)6只大鼠;(3)膿毒癥組(n=30),動(dòng)物行盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)術(shù)后3,6,12,24和48h五時(shí)點(diǎn)行與正常對(duì)照組相同的操作步驟,每時(shí)相點(diǎn)6只大鼠。
結(jié)果:1
3、.膿毒癥組在CLP術(shù)后3h血清OCT水平即升高(5.9805±0.07u/l),與正常對(duì)照組和假手術(shù)組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且逐步升高,在24小時(shí)以后,扔保持較高的水平。2.血清TNF-α水平在CLP術(shù)后即明顯高于正常對(duì)照組與假手術(shù)組(P<0.01),在24h達(dá)峰值(390.94±27.70 pg/ml),隨后有下降趨勢(shì),但仍顯著高于正常對(duì)照組和假手術(shù)組(P<0.01)。3.CLP術(shù)后3h血清sE-selectin水平開
4、始升高(1.6292±0.01ng/ml),高于正常對(duì)照組與假手術(shù)組(P<0.05),且隨著時(shí)間的推移,一直保持較高的水平。4.肝臟水含量在CLP3小時(shí)以后逐漸增加,但直到傷后12h才出現(xiàn)明顯變化(P<0.05)。5.電鏡下觀察肝臟血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)在膿毒癥發(fā)展過(guò)程中損害逐漸加重,且根據(jù)《黎鰲燒傷學(xué)》血管內(nèi)皮超微結(jié)構(gòu)損傷評(píng)分標(biāo)準(zhǔn),內(nèi)皮細(xì)胞損傷程度隨時(shí)間推移分值逐漸增高。6.所有數(shù)據(jù)以"均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差"表示,采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件
5、包進(jìn)行分析,樣本均數(shù)間的比較采用t檢驗(yàn);OCT和 sE- selectin,TNF-α和sE-selectin的相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。OCT和sE-selectin;TNF-α和sE-selectin具有顯著正相關(guān),Spearman相關(guān)系數(shù)分別0.947和0.781,均為P<0.01。
結(jié)論:1.在膿毒癥致急性肝損傷發(fā)病過(guò)程中,肝臟巨噬細(xì)胞參與了肝損傷的發(fā)生和發(fā)展,TNF-α是誘導(dǎo)sE-selectin上
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