2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡介

1、目的：應用RNA干擾技術(siRNA)介導GBM腫瘤干細胞Notch-1基因下調誘導腫瘤干細胞凋亡的研究。
　　 方法：實驗采用無血清培養(yǎng)基誘導GBM腫瘤干細胞，同時對腫瘤干細胞分子標志CD133和nestine行免疫熒光鑒定；實驗設以Notch-1為基因靶點的siRNAl、siRNA2、siRNA3實驗組、GAPDHsiRNA陽性對照組、非特異性無關序列siRNA陰性對照組和未轉染siRNA的空白對照組，采用Lepofecta

2、mineTM2000二次轉染方法將siRNA轉移到細胞內。實時熒光定量PCR定量和Westernblot分別在基因和蛋白水平檢測siRNA對Notch-l基因表達的抑制作用；四唑鹽(MTT)比色法檢測細胞增殖活性；AnnexinV/PI法進行凋亡分析。
　　 結果：(1)采用無血清培養(yǎng)TJ905細胞可以誘導出腫瘤干細胞球，腫瘤干細胞對CD133和nestine具有免疫反應活性；(2)采用LepofectamineTM2000二次

3、轉染方法可以高效地將siRNA轉移到細胞內，化學合成的siRNA明顯抑制Notch-lmRNA的表達水平，空白對照組、陰性對照組、siRNAl、2、3轉染組Notch-lmRNA表達率分別為1.00±0.05，1.03±0.08，0.25±0.05，0.42士0.050.80士0.02，siRNAl可以明顯的下調Notch-1蛋白表達水平；(3)siRNA1轉染組MTT檢測細胞增殖活性顯著降低，AnnexinV/PI法凋亡分析顯示細胞凋

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