n-3多不飽和脂肪酸對(duì)2型糖尿病大鼠肝臟脂質(zhì)沉積的影響.pdf

1、目的：觀(guān)察n-3多不飽和脂肪酸(n-3-Polyunsaturated fatty acids，n-3-PUFAs)對(duì)2型糖尿病大鼠糖脂代謝和肝臟脂質(zhì)沉積的影響，并探討其可能的分子機(jī)制。
　　 方法：50只Wistar大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為正常對(duì)照組10只和造模組40只，造模組用高脂高糖飼料喂養(yǎng)加鏈脲佐菌素(STZ)注射建立2型糖尿病模型，對(duì)照組注射等量緩沖液。造模成功后，挑選造模成功大鼠28只，隨機(jī)分為模型組8只、n-

2、3-PUFAs組和格列喹酮組各10只。N-3-PUFAs組給予n-3-PUFAs溶液135mg/kg/d灌胃；格列喹酮組給予格列喹酮水溶液13.5mg/kg/d 液灌胃；模型組和正常組給予等量蒸溜水灌胃，持續(xù)給藥12周。于開(kāi)始給藥前、給藥6周和12周末，分別觀(guān)察各組大鼠體重(BW)、血清空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，處死大鼠，分別稱(chēng)取大鼠腹腔脂肪和肝臟濕重，并計(jì)算腹腔內(nèi)脂肪指數(shù)和肝臟指數(shù)；光鏡下

3、觀(guān)察肝組織病理變化；檢測(cè)肝組織TG、TC含量；并用RT-PCR法檢測(cè)肝組織固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)和乙酰輔酶A羧化酶(ACC)mRNA的表達(dá)，Western印跡法檢測(cè)肝組織SREBP-1c蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果：(1)各組大鼠體重和體脂變化：給藥12周后，模型組大鼠體重較正常組降低(P<0.05)；n-3-PUFAs組大鼠體重較模型組增加(P<0.01)。給藥6周和12周后，格列喹

4、酮組大鼠體重較模型組明顯降低(P<0.05或P<0.01)。模型組大鼠肝臟指數(shù)較正常組增加(P<0.01)。N-3-PUFAs組大鼠腹腔內(nèi)脂肪指數(shù)、肝臟指數(shù)均較模型組明顯增加(P<0.01)。格列喹酮組肝臟指數(shù)較模型組降低(P<0.01或P<0.05)。
　　 (2)各組大鼠FBG的比較：給藥前，各組大鼠FBG均較正常組明顯升高(P<0.01)。給藥12周后，n-3-PUFAs組大鼠FBG較模型組降低(P<0.05)。給藥6、1

5、2周后，格列喹酮組大鼠FBG與模型組比較顯著降低(P<0.01)。N-3-PUFAs組和格列喹酮組大鼠FBG隨給藥時(shí)間的延長(zhǎng)而降低(P<0.01或P<0.05)。
　　 (3)各組大鼠血清和肝組織TG、TC含量的比較：給藥6、12周末，模型組大鼠血清TG、TC較正常組升高(P<0.01)；給藥12周后，n-3-PUFAs組大鼠血清TG較模型組降低(P<0.01)。給藥6、12周后，格列喹酮組大鼠血清TC水平較模型組降低(P<0.

6、01或P<0.05)。模型組和n-3-PUFAs組大鼠肝組織TG含量較正常組明顯升高(P<0.01)；n-3-PUFAs大鼠肝臟TG含量較模型組升高(P<0.05)；格列喹酮組大鼠肝臟TG含量較模型組降低(P<0.05)；各組大鼠肝組織中TC含量較正常組升高(P<0.01或P<0.05)，但組間比較無(wú)顯著性差異。
　　 (4)各組大鼠肝組織形態(tài)學(xué)比較：光鏡下，模型組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)明顯紊亂，肝細(xì)胞索消失，肝細(xì)胞變大，肝細(xì)胞胞漿內(nèi)可

7、見(jiàn)大量微泡性脂肪變性；n-3-PUFAs組肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)欠清晰，竇間隙不清，胞漿內(nèi)可見(jiàn)廣泛的大小不等圓形空泡，出現(xiàn)廣泛肝細(xì)胞空泡變性；格列喹酮組肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，肝細(xì)胞呈放射狀排列，胞核清楚，胞漿內(nèi)可見(jiàn)少量小泡性的脂肪變性。各組大鼠肝臟脂肪變記分較正常組明顯升高(P<0.01)；n-3-PUFAs組大鼠脂肪變記分較模型組明顯升高(P<0.01)；格列喹酮組大鼠脂肪變記分較模型組降低(P<0.01)。
　　 (5)各組大鼠SREBP-1

8、c、FAS和ACCmRNA表達(dá)的比較：與正常組相比，模型組大鼠肝組織SREBP-1c、FAS和ACCmRNA的表達(dá)顯著升高(P＜0.01)；與模型組比較，n-3-PUFAs組大鼠肝組織SREBP-1c和FASmRNA的表達(dá)升高(P＜0.05)；格列喹酮組大鼠肝組織SREBP-1c、ACCmRNA表達(dá)顯著降低(P＜0.01)。
　　 (6)各組大鼠SREBP-1c蛋白表達(dá)的比較：與正常組相比，模型組大鼠肝組織SREBP-1c蛋白的

9、表達(dá)顯著升高(P＜0.01)。N-3-PUFAs組大鼠肝組織SREBP-1c蛋白的表達(dá)較模型組升高(P＜0.05)。與模型組比較，格列喹酮組大鼠肝組織SREBP-1c蛋白顯著降低(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：n-3-PUFAs能夠降低血清TG、輕微降低血糖，但會(huì)導(dǎo)致體重、腹腔脂肪增加及肝臟脂質(zhì)沉積，其機(jī)理與n-3-PUFAs不能抑制SREBP-1c及其下游脂肪合成相關(guān)酶FAS及ACC的表達(dá)有關(guān)。故臨床上2型糖尿病患者在應(yīng)用n-