燈黃顆粒的研制及對糖尿病腎病保護作用的研究.pdf

1、目的：⑴研制燈黃顆粒(Denghuang Granule，DHG)，為糖尿病腎病(Diabetic nephropathy，DN)的防治提供一種安全、有效的純中藥制劑。⑵以鏈脲佐菌素(Streptozotocin.STZ)法建立糖尿病大鼠模型，觀察DHG對其腎臟的保護作用，并探討可能的機制。
　　 方法：①以提取物中燈盞花乙素(Scutellarin，Scu)和大黃酸(Rhein，Rh)含量為指標(biāo)，正交試驗優(yōu)選DHG的超聲提取工

2、藝。以制濕粒難易程度為指標(biāo)，篩選DHG制備中填充劑的種類、用量，以及潤濕劑的濃度，確立DHG的成型工藝。以HPLC法測定其主要成分Scu和Rh的含量。②將200-250g正常雄性Wistar大鼠一次性腹腔注射STZ誘導(dǎo)成糖尿病后，隨機分為5組，分別為糖尿病對照組(DM，正常飲水)、卡托普利治療組(Cap，10mg/kg)、DHG低劑量組(LD，30mg/kg)、DHG中劑量組(MD，60mg/kg)及DHG高劑量組(HD，120mg/k

3、g)，每組10只，另取10只正常大鼠作為正常對照組。各治療組按以上劑量每日上午灌胃給藥。給藥12w后處死大鼠，取血、尿和腎臟標(biāo)本，測定血糖、血尿素氮(BUN)、甘油三醇(TG)、膽固醇(TC)，尿肌酐(Cr)、血肌酐(Scr)并計算內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)，24h尿白蛋白排泄率(UAER)、腎指數(shù)及腎組織超氧化物歧化酶(SOD)的活性；光學(xué)顯微鏡下觀察各組腎臟組織病理學(xué)改變并經(jīng)圖像分析測定平均腎小球面積(MGPA)和體積(MPV)。

4、r>　　 結(jié)果：⑴DHG最佳提取工藝為：按處方取藥材粗粉，加15倍藥材體積75％乙醇溶液，水浴下，400W功率，每超聲10秒，間歇10秒方式超聲15min(凈超聲時間)，200目濾布預(yù)濾過，濾紙濾過，殘渣同法再提取1次，合并濾液，減壓濃縮、65℃減壓干燥，粉碎，過80目篩，得干浸膏粉。⑵DHG最佳成型工藝為：將干浸膏粉與可溶性淀粉按1:2比例混合均勻，噴溶解有5‰(按干浸膏粉與可溶性淀粉合計質(zhì)量)甜菊糖的70％乙醇溶液適量，制成軟材，

5、擠壓過14目篩，60℃干燥1h，再過14目篩，60℃干燥4h，整粒，干顆粒稱重，即得。⑶12w后，與正常對照組比較，糖尿病組大鼠血糖、BUN、TG、TC、Cr、Scr、Ccr、UAER、腎指數(shù)、MGPA及MPV明顯升高(p<0.01)，體重和腎組織SOD活性明顯降低(p<0.01)。與糖尿病組比較，在上述除血糖和體重外其余指標(biāo)中，DHG高對其余11個指標(biāo)均可顯著改善病理變化；中劑量組除對TC改變無顯著性差異外，對其余10個指標(biāo)均可顯著改

6、善病理變化；而低劑量組僅對TG、UAER、SOD、腎指數(shù)及MPV等5個指標(biāo)有改善作用，卡托普利組對除TG、TC外的指標(biāo)有改善作用。
　　 結(jié)論：①以超聲波提取DHG的工藝簡便可行，成品中有效成分含量理想。②DHG成型工藝成熟，成品中Scu和Rh含量測定方法簡便，可靠。③糖尿病大鼠12w時腎臟出現(xiàn)明顯的結(jié)構(gòu)和功能改變。④DHG對DN有較好的保護作用，該保護作用呈劑量依賴性，以高劑量組的療效最佳。機制可能與所含主要成分燈盞花乙素和大