立枯絲核菌胞壁降解酶及其在致病中的作用.pdf

1、采用改良的Marcus培養(yǎng)液培養(yǎng)立枯絲核菌(Rhizoctonia solani Kuhn),濾液經(jīng)離心,留上清液即粗酶液.粗酶液具有Cx、PG、PMG、PGTE和PMTE等5種胞壁降解酶的活性.其中前三種酶活性較高,后兩種酶活性較低.立枯絲核菌產(chǎn)生胞壁降解酶的最佳條件是:培養(yǎng)時間為6d;培養(yǎng)溫度為28℃;培養(yǎng)液初始pH為5左右;培養(yǎng)時不需振蕩.以病菌接種成株期水稻倒二葉鞘,發(fā)病后分別檢測枯白、褐色和褪綠部位組織中胞壁降解酶的活性.三部

2、位組織中均有上述5種胞壁降解酶存在,其中PG活性最高,達(dá)21.123 U/mg;其次是PMG;而PGTE和PMTE活性很低,約為0.1U/mg.從不同部位組織來看,褪綠部胞壁降解酶活性最高,達(dá)13.417 U/mg;其次是褐色部,酶活性為11.765 U/mg,再次為枯白部.這表明病菌胞壁降解酶在病斑形成和擴展中起重要作用.立枯絲核菌胞壁降解酶對水稻組織細(xì)胞具有顯著的破壞作用.粗酶液處理能引起水稻苗期葉鞘黃化,呈水漬狀.顯微觀察表明,粗

3、酶液可破壞愈傷組織細(xì)胞,酶液處理24h后細(xì)胞壁扭曲變形、壁部分消解或出現(xiàn)微纖絲;處理48h后細(xì)胞壁破裂,細(xì)胞質(zhì)大量外泄.通過電鏡觀察發(fā)現(xiàn),粗酶液對苗期水稻葉鞘組織細(xì)胞也有破壞,酶液處理36h后細(xì)胞出現(xiàn)質(zhì)壁分離、細(xì)胞壁部分?jǐn)嗔选⒓?xì)胞器分辨不清、葉綠體和線粒體受損等現(xiàn)象.立枯絲核菌胞壁降解酶對水稻葉鞘細(xì)胞膜也有明顯損傷作用.酶液處理后細(xì)胞透性改變,其損傷影響混合酶大于單一酶,果膠酶大于纖維素酶.立枯絲核菌不同菌株產(chǎn)生胞壁降解酶的能力有一定差