TGF-β-,1-介導(dǎo)的MMP-2酶活性調(diào)控機(jī)制在FDM鞏膜重塑中的作用.pdf

1、目的:該課題以小雞形覺(jué)剝奪性近視眼動(dòng)物模型為研究對(duì)象,探索基質(zhì)金屬蛋白酶-2在小雞FDM鞏膜細(xì)胞外基質(zhì)重塑中的重要作用及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1對(duì)其表達(dá)與活性的調(diào)控.方法:課題分三部分進(jìn)行研究.第一部分建立小雞FDM、近視恢復(fù)眼動(dòng)物模型,采用組織病理切片HE染色、明膠酶譜法、逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)免疫組化等方法研究MD對(duì)被剝奪眼后極部鞏膜MMP-2及其組織特異性抑制劑-2表達(dá)的影響.第二部分在第一部分基礎(chǔ)上,體外培養(yǎng)正常與MD(14d)小雞眼后

2、極部鞏膜,同時(shí)以TGF-β1、腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、纖維連接蛋白(Fibronectin,FN)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(Ovotransferrin)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)進(jìn)行干預(yù),24h后采用明膠酶譜法檢測(cè)MMP-2酶活性水平變化,采用RT-PCR法檢測(cè)MMP-2、TIMP-2 mRNA表達(dá)的變化以篩選出調(diào)控MMP

3、-2表達(dá)的陽(yáng)性細(xì)胞因子.第三部分采用球后注射法給正常與MD雞眼注射尿激酶型纖溶酶原激活劑纖溶酶原激活劑抑制劑-1以促進(jìn)或抑制TGF-β表達(dá)與活化,每日1次,14d后觀察uPA、PAI-1對(duì)正常與FDM小雞眼軸與屈光度變化的影響,結(jié)論:(1)后極部鞏膜MMP-2酶活性特異性增高為小雞FDM鞏膜重塑的重要直接因素,而TIMP-2抑制與基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)參與MMP-2酶活性調(diào)節(jié)過(guò)程;(2)TGF-β1能明顯抑制小雞后極部鞏膜MMP-2酶活性,其