急性胰腺炎腺泡細胞凋亡機制及藥物干預(yù)的實驗研究.pdf

1、本文旨在探討大鼠急性胰腺炎腺泡細胞的凋亡與病情嚴(yán)重程度的關(guān)系及凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2、Caspase-8的表達情況，觀察大鼠急性胰腺炎胰腺病理改變、血清淀粉酶、炎性細胞因子水平等相關(guān)指標(biāo)的變化及清胰湯等不同藥物治療的作用環(huán)節(jié)，以探索急性胰腺炎腺泡細胞凋亡機制及藥物治療的有效途徑。 方法：經(jīng)膽胰管逆行注入不同濃度去氧膽酸鈉制備大鼠急性水腫性胰腺炎(acuteedematouspancreatitis，AEP)和急性壞死性胰

2、腺炎(ANP)模型。60只SD大鼠隨機分為假手術(shù)組、AEP組、ANP組及對ANP的三個治療組，清胰湯組治療劑量為1ml/100g，善寧組治療劑量為20μg/kg，地塞米松組治療劑量為2mg/kg，各治療組于造模后立即一次和造模后12h再次給藥。24h后采取標(biāo)本做病理檢查和各項指標(biāo)檢測。 光鏡下觀察各組胰腺標(biāo)本病理改變，進行組織學(xué)評分；采用TUNEL技術(shù)檢測胰腺腺泡細胞的凋亡，計算凋亡指數(shù)；應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR

3、)檢測胰腺組織中Bax、Bcl-2、Caspase-8mRNA的表達。 結(jié)果：AEP組與ANP組腺泡細胞凋亡指數(shù)、Bax及Caspase-8mRNA表達水平均顯著高于假手術(shù)組，且AEP組腺泡細胞凋亡指數(shù)及BaxmRNA表達水平顯著高于ANP組，ANP組Bcl-2mRNA表達水平顯著高于假手術(shù)組。同時，AEP組與ANP組病理組織學(xué)評分、血清淀粉酶、血清促炎性細胞因子等指標(biāo)均較假手術(shù)組顯著升高，且ANP組顯著高于AEP組(p＜0.0

4、1)。清胰湯、善寧、地塞米松可以促進腺泡細胞凋亡，上調(diào)BaxmRNA表達水平，減輕胰腺組織損害，清胰湯與善寧可上調(diào)Bcl-2mRNA表達水平，對Caspase-8mRNA表達水平均無明顯作用。清胰湯組胰腺病理組織學(xué)評分改善最明顯，血清TNF-α檢測指標(biāo)下降顯著。善寧組抑制血清淀粉酶作用最強。地塞米松組血清IL-6水平下降最顯著。 結(jié)論：急性胰腺炎時腺泡細胞的凋亡與病情輕重呈負相關(guān)的關(guān)系，腺泡細胞凋亡可能是急性胰腺炎時機體的保護機

5、制之一。BaxmRNA與Caspase-8mRNA表達水平同腺泡細胞凋亡呈正相關(guān)關(guān)系，是促進腺泡細胞凋亡的基因。清胰湯、善寧、地塞米松可以上調(diào)BaxmRNA表達，促進腺泡細胞凋亡減輕胰腺病理損害，降低血清淀粉酶、TNF-α、IL-6水平等，改善病情，清胰湯作用最明顯。清胰湯和善寧還可上調(diào)Bcl-2mRNA的表達，可能與胰腺導(dǎo)管管狀復(fù)合體的增生有關(guān)。若能合理選擇藥物，中西藥聯(lián)合應(yīng)用，作用于AP發(fā)病的不同環(huán)節(jié)，有效調(diào)控腺泡細胞的凋亡，將會為