酰胺類T3SS抑制劑的合成和生物活性研究.pdf

1、銅綠假單胞菌PAO1是一種革蘭氏陰性機(jī)會(huì)性人類病原菌，易感染免疫受損的人群。III型分泌系統(tǒng)（Type three secretion system, T3SS）是其主要的致病因子。T3SS抑制劑的策略是抑制銅綠假單胞菌表達(dá)及分泌毒力蛋白，阻止其對(duì)宿主細(xì)胞的侵染。
　　本文在一種已知T3SS抑制劑MBX1641的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)和合成了28種α-苯氧基酰胺新衍生物，系統(tǒng)研究了它們的構(gòu)效關(guān)系。研究表明有五種新衍生物對(duì)銅綠假單胞菌的一

2、個(gè)效應(yīng)子編碼基因exoS的表達(dá)具有明顯抑制作用。其中N-[3,4-(次甲基二氧)芐基]-2-(2,4-二氯苯氧)-丁酰胺（5e）、N-[3,4-(二甲氧基)芐基-1-甲基]-2-(2,4-二氟苯氧)-丁酰胺（8b）和N-[3,4-(次甲基二氧)芐基]-(R)-2-(2,4-二氯苯氧)-丁酰胺（12b）的活性強(qiáng)于MBX1641；N-(2-吡啶基甲基)-2-(2,4-二氯苯氧)-丁酰胺（5p）和N-[3,4-(次甲基二氧)芐基]-2-(2,

3、4-二氯苯氧)-硫代丁酰胺（33）的抑制活性與MBX1641的相當(dāng)，并且5p具有很好的水溶性?？垢腥緦?shí)驗(yàn)結(jié)果表明，衍生物N-[3,4-(次甲基二氧)芐基]-2-(2,4-二氯苯氧)-丁酰胺（5e）的濃度為50μM和100μM時(shí)能抑制綠膿桿菌感染HeLa細(xì)胞。
　　目標(biāo)衍生物5a-5s、8a和8b的合成，采用了三步簡(jiǎn)單的反應(yīng)：首先是取代苯酚1與不同的α-溴代酯2在碳酸鉀存在下反應(yīng)，將酚羥基醚化得到相應(yīng)的α-苯氧基酯3a-3l；接著經(jīng)

4、過(guò)氫氧化鋰水解，產(chǎn)生相應(yīng)的羧酸4a-4l；最后在EDC/HOBt作用下，4a-4l分別同相應(yīng)的胺縮合，則得到一系列α-苯氧基酰胺5a-5s、8a和8b。其中合成8a和8b的胺是由3,4-(亞甲二氧基)苯乙酮經(jīng)氰基硼氫化鈉還原得到。當(dāng)用2,4-二氯芐氧基取代2,4-二氯苯氧基后，相應(yīng)的產(chǎn)物N-[3,4-(次甲基二氧)芐基]-2-(2,4-二氯芐氧)-丁酰胺32同樣可以經(jīng)過(guò)這三步反應(yīng)得到。而當(dāng)2,4-二氯苯氧基與3,4-(次甲二氧基)芐基換

5、位后，也可以通過(guò)類似的方法合成相應(yīng)產(chǎn)物 N-[2-(2,4-二氯芐基]-2-[(3,4-(次甲基二氧)苯基)-丁酰胺26。衍生物20的合成也可以采用類似的方法，但是反應(yīng)中的α-溴代酯需自己制備。5l在氫氣和鈀碳條件下被還原成相應(yīng)的胺21。5e在勞森試劑作用下得到硫代酰胺衍生物33。另外，MBX1641的酯類似物28是由2-(2,4-二氯苯氧)-丁酸4e與3,4-(次甲基二氧)芐醇縮合得到?；衔?e對(duì)應(yīng)的手性化合物12a和12b則是由手