智力障礙遺傳機(jī)理研究——探討不明原因智障基因拷貝數(shù)變異.pdf

1、背景和目的：
　　 智力障礙(mental retardation，MR)是一種嚴(yán)重危害兒童身心健康的綜合癥，為主要出生缺陷之一；其發(fā)病率高、病因復(fù)雜、危害性大，在全世界發(fā)病率約為2-3%，已經(jīng)成為一個(gè)世界范圍內(nèi)的社會(huì)問(wèn)題[1、2]。智力障礙給患者造成終生痛苦，同時(shí)為家庭及社會(huì)帶來(lái)沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，因此，做好智力障礙的診斷及篩查工作并研究清楚智力障礙的發(fā)病機(jī)理備受世界關(guān)注。智力障礙的病因復(fù)雜，既有外在的環(huán)境因素又有內(nèi)在的遺傳因素。

2、近年來(lái)，遺傳因素在病因構(gòu)成中日顯突出，包括各類(lèi)型的染色體異常、單基因突變或多基因突變等，而受檢測(cè)技術(shù)條件的限制，近50% MR原因不明確[3]。因此，深入研究智力障礙的遺傳學(xué)機(jī)理，將遺傳性智力障礙篩查與診斷用于重點(diǎn)人群孕前一級(jí)預(yù)防、降低和消除高危人群再生育風(fēng)險(xiǎn)，是防治先天性智力障礙有效的途徑。本文旨：(1)對(duì)372例智力障礙患者進(jìn)行遺傳學(xué)篩查并對(duì)不明原因智力障礙基因拷貝數(shù)變異(copy number variations，CNVs)高發(fā)

3、區(qū)上的智障候選基因(ALDOA、TBX6、CYFP1、Ndel)進(jìn)行探索性遺傳學(xué)分析；(2)整合多種遺傳學(xué)檢測(cè)技術(shù)深入研究?jī)衫厥夂诵椭钦喜±倪z傳學(xué)機(jī)理。
　　 方法：
　　 (1)使用G顯帶染色體核型分析技術(shù)、多重連接依賴(lài)性探針擴(kuò)增技術(shù)(Multiplexligation-dependent probe amplification MLPA)對(duì)智障患者進(jìn)行遺傳學(xué)篩查；建立多重PCR對(duì)不明原因智障患者拷貝數(shù)變異高發(fā)區(qū)1

4、6p11.2、16p13.11、15q11.2上的四個(gè)智障候選基因ALDOA、TBX6、CYFP1、Ndel進(jìn)行探索性遺傳學(xué)分析。(2)整合多種分子遺傳學(xué)技術(shù)：多重連接依賴(lài)性探針擴(kuò)增技術(shù)(MLPA)、微陣列比較基因組雜交技術(shù)(Array-based Comparative Genomic Hybridization，Array-CGH)、以單核苷酸多態(tài)性基因分型為基礎(chǔ)的微陣列技術(shù)(single nucleotide polymorphi

5、sms array，SNP array)及短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)檢測(cè)技術(shù)對(duì)兩例特殊核型MR病例進(jìn)行遺傳學(xué)分析與驗(yàn)證。
　　 結(jié)果：
　　 1.372例智力障礙患者中異常核型78例，占20.96%，亞端粒微重排7例，占2.0%。不明原因MR拷貝數(shù)變異高發(fā)區(qū)內(nèi)的智障候選基因遺傳學(xué)篩查結(jié)果顯示1例疑似陽(yáng)性病例。
　　 2.發(fā)現(xiàn)一例新染色體異常核型：45，XX，psu dic(11；9)(p15；p24)，MLPA分析

6、顯示9號(hào)染色體亞端粒微缺失，利用SNP array芯片進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，9p24.3-p24.1雜合缺失8Mb、9p24.1-p23純合缺失5 Mb、9p23-p21.2重復(fù)12.5 Mb，核型描述為45，XX，psudic(9:11)(11qter->cen->11p15：：9p24->cen->9qter)。9p24.3到9p23缺失的區(qū)域包含一個(gè)潛在的與孤獨(dú)綜合癥相關(guān)的位點(diǎn)，該患者表現(xiàn)典型的孤獨(dú)癥癥狀。9p23到9p21.2重復(fù)的區(qū)

7、域包含典型9p重復(fù)綜合癥的范圍，該患者表現(xiàn)有9p重復(fù)綜合癥的癥狀，包括智力發(fā)育遲緩，語(yǔ)言障礙和小指彎曲等。
　　 發(fā)現(xiàn)一例額外標(biāo)記染色體核型：47，XY，+mar，MLPA顯示此額外標(biāo)記染色體來(lái)源于15號(hào)染色體且母源性復(fù)制增加；基因組拷貝數(shù)變異區(qū)域?yàn)?5q11-13，大小9.8 Mb，基因位點(diǎn)：20477397-30298155。
　　 結(jié)論：
　　 1.利用多種分子及細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)構(gòu)建合理有效的遺傳性智力障礙診