噪聲應(yīng)激對(duì)大鼠動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞GRP78和CHOP表達(dá)的影響及拉西地平干預(yù)的研究.pdf

1、研究背景及目的
　　高血壓是危害人類健康最為常見的慢性病，同時(shí)也是人類的主要死亡原因之一。高血壓的發(fā)病除與遺傳因素密切相關(guān)外，環(huán)境因素也起著十分重要的作用。流行病學(xué)資料結(jié)果顯示，一定強(qiáng)度的應(yīng)激刺激是導(dǎo)致高血壓的重要原因。噪聲是人們生活和工作環(huán)境中經(jīng)常接觸的外界因素，除可以引起聽覺損傷之外，還能導(dǎo)致神經(jīng)、心血管系統(tǒng)等功能的非特異性損傷，其中對(duì)血壓的影響已經(jīng)引起廣泛的關(guān)注。
　　內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是由于某種原因所導(dǎo)致的細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)失衡

2、，并引起生理功能發(fā)生紊亂的一種亞細(xì)胞器上的病理過程。目前的研究表明，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與多種心血管疾病關(guān)系密切，包括冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化等。拉西地平（1acidipine）是一種新型的二氫吡啶類鈣通道阻滯劑（calcium-channelblocker，CCB），其在平穩(wěn)降壓的同時(shí)可有效地保護(hù)靶器官，具有血管舒張、良好的改善內(nèi)皮功能、抑制平滑肌細(xì)胞增殖、抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用，并可顯著降低高血壓所致心腦血管并發(fā)癥的發(fā)生。但是拉西地平是否在噪聲應(yīng)

3、激條件下具有心血管保護(hù)作用，目前尚不十分清楚。血管系統(tǒng)在高血壓的發(fā)生發(fā)展中直接參與高血壓的始動(dòng)和維持機(jī)制，同時(shí)又是高血壓時(shí)受累的主要靶器官，大多數(shù)心腦血管并發(fā)癥均是血管病變的直接或間接后果。本課題通過建立噪聲應(yīng)激大鼠模型，觀察大鼠血壓和動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78和CHOP表達(dá)的變化，研究動(dòng)脈血管中層厚度的變化，并初步探討鈣通道阻滯劑對(duì)噪聲應(yīng)激大鼠動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響。旨在為噪聲應(yīng)激所致動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞

4、損害的發(fā)生機(jī)制提供理論依據(jù)，同時(shí)對(duì)其防治提供新的靶點(diǎn)。
　　研究方法
　　本研究以大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過噪聲應(yīng)激環(huán)境建立噪聲應(yīng)激大鼠模型。采用頸動(dòng)脈插管、免疫組化染色、蛋白免疫印記法（Western-blot）等實(shí)驗(yàn)技術(shù)和方法，觀察：（1）噪聲應(yīng)激后大鼠血壓的變化；（2）噪聲應(yīng)激后動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞GRP78和CHOP表達(dá)的變化；（3）噪聲應(yīng)激后動(dòng)脈血管中層厚度的變化；（4）拉西地平對(duì)噪聲應(yīng)激大鼠動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞GRP78、

5、CHOP表達(dá)和動(dòng)脈血管中層厚度的影響。
　　研究結(jié)果
　?。?）除2w亞組外，對(duì)照組4w、6w、8w各亞組平均動(dòng)脈壓(MAP)（分別為123.79±8.86mmHg、125.53±9.87mmHg、123.60±9.36mmHg），均低于相應(yīng)噪聲組（166.90±8.32mmHg、174.23±8.57mmHg、178.56±9.03mmHg）,并有非常顯著性差異（P<0.01），且隨著應(yīng)激時(shí)間的延長，血壓呈遞增趨勢；（2）

6、除2w亞組外，噪聲組4w、6w、8w亞組GRP78表達(dá)（OD值分別為0.65±0.03、0.88±0.04、0.63±0.03）均高于相應(yīng)對(duì)照組（OD值分別為0.47±0.02、0.47±0.03、0.46±0.03），并有非常顯著性差異（P<0.01）。噪聲組GRP78的表達(dá)，6w亞組達(dá)到最高值，8w亞組減弱，但仍高于2w亞組；（3）噪聲組4w、6w、8w亞組GRP78表達(dá)含量分別為0.42±0.03、0.79±0.03、0.45±0

7、.01，均高于相應(yīng)對(duì)照組（分別為0.27±0.02、0.28±0.03、0.29±0.03），并有非常顯著性差異（P<0.01）;（4）噪聲組4w、6w、8w亞組CHOP表達(dá)（OD值分別為0.45±0.05、0.56±0.04、0.67±0.03）高于相應(yīng)對(duì)照組（OD值分別為、0.37±0.02、0.39±0.03、0.38±0.02）,并有非常顯著性差異（P<0.01）。噪聲組CHOP的表達(dá)隨著應(yīng)激時(shí)間的延長逐漸增加，8w達(dá)到最高值。

8、（5）噪聲組4w、6w、8w亞組CHOP表達(dá)含量分別為0.41±0.03、0.58±0.03、0.71±0.03，均高于相應(yīng)對(duì)照組（分別為0.13±0.01、0.12±0.02、0.14±0.02），并有非常顯著性差異（P<0.01）;（6）噪聲組2w、4w亞組血管中層厚度(分別為93.45±4.42μm、95.49±4.06μm)大于相應(yīng)對(duì)照組（92.91±4.03μm、93.22±3.89μm），但組間比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.0

9、5）；噪聲組6w、8w（105.89±4.36μm、110.46±5.11μm）亞組與相應(yīng)對(duì)照組（93.19±4.32μm、92.67±3.77μm）血管中層厚度組間比較均有顯著性差異（P<0.05）；噪聲組4w、6w、8w各亞組組間比較均有非常顯著性差異（P<0.01）；（7）對(duì)照組、噪聲組及拉西地平+噪聲組的MAP分別為118.65±9.84mmHg、174.23±6.26mmHg、139.23±8.14mmHg，拉西地平+噪聲組的

10、MAP低于噪聲組，高于對(duì)照組。對(duì)照組與拉西地平+噪聲組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；噪聲組與拉西地平+噪聲組比較非常顯著性差異（P<0.01）；（8）對(duì)照組、噪聲組、拉西地平+噪聲組OD值分別為0.46±0.03、0.87±0.04、0.74±0.04，拉西地平+噪聲組OD值高于對(duì)照組，低于噪聲組，組間比較有非常顯著性差異(P<0.01)；（9）對(duì)照組、噪聲組及拉西地平+噪聲組OD值分別為0.37±0.02、0.57±0.04、0.

11、49±0.03，拉西地平+噪聲組OD值低于噪聲組，高于對(duì)照組，組間比較有非常顯著性差異(P<0.01)；（10）對(duì)照組、噪聲組及拉西地平+噪聲組血管中膜厚度分別為93.13±4.12μm、105.89±4.36μm、94.56±3.97μm。噪聲組主動(dòng)脈中層厚度顯著增厚，與對(duì)照組比有非常顯著性差異（P<0.01），拉西地平+噪聲組血管中層厚度略高于對(duì)照組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　研究結(jié)論
　?。?）噪聲應(yīng)激后隨