Exendin-4對甲基乙二醛誘導(dǎo)的PC12細胞氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、背景與目的:糖尿病相關(guān)性神經(jīng)退行性疾病與氧化應(yīng)激密切相關(guān),高血糖導(dǎo)致甲基乙二醛大量蓄積。本課題擬探討甲基乙二醛誘導(dǎo)PC12細胞氧化應(yīng)激的機制,并在此基礎(chǔ)上加用胰高血糖素樣肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)受體激動劑Exendin-4,研究其對甲基乙二醛誘導(dǎo)PC12細胞氧化應(yīng)激的影響及其機制。
　　實驗與方法:傳代培養(yǎng)PC12細胞,不同濃度甲基乙二醛(0~2.0mmol/l)處理PC12細胞12h~

2、48h,MTT比色法檢測細胞存活率;在此基礎(chǔ)上加用Exendin-4預(yù)處理細胞24h,0.75mmol/l甲基乙二醛干預(yù)24h,以N-乙酰半胱氨酸(NAC)預(yù)處理PC12細胞24小時為陽性對照,MTT比色法檢測細胞存活率,熒光酶標儀檢測ROS含量,黃嘌呤氧化酶法檢測SOD活力。應(yīng)用Exendin-4100nmol/L或NAC10mmol/L預(yù)處理PC12細胞24小時,0.75mmol/L甲基乙二醛作用1小時,Western Blot檢測

3、蛋白P-IκB-α、IκB-α表達情況。
　　結(jié)果:隨著MG作用濃度的增加和作用時間的延長,PC12細胞存活率逐漸降低;Exendin-4預(yù)處理PC12細胞24h,在25~100nmol/LExendin-4作用下,濃度依賴性地增加MG誘導(dǎo)的PC12細胞的存活率,但是在200nmol/LExendin-4干預(yù)組,PC12細胞的存活率并沒有比100nmol/LExendin-4干預(yù)組有進一步升高;以NAC預(yù)處理24小時為陽性對照,與

4、MG單獨處理組相比,Exendin-4預(yù)處理組的ROS表達量下降了65.30％(p<0.01);NAC預(yù)處理組ROS表達量下降了107.40%(p<0.01);Exendin-4預(yù)處理組的SOD活力增加了5.30U/mgprot(p<0.01);NAC預(yù)處理組的SOD活力增加了8.53U/mgprot(p<0.01)。Exendin-4預(yù)處理組的P-IκB-α/IκB-α比例下降了25.50%(p<0.01);NAC預(yù)處理組的P-IκB