Exendin-4對(duì)甲基乙二醛誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、背景與目的:糖尿病相關(guān)性神經(jīng)退行性疾病與氧化應(yīng)激密切相關(guān),高血糖導(dǎo)致甲基乙二醛大量蓄積。本課題擬探討甲基乙二醛誘導(dǎo)PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激的機(jī)制,并在此基礎(chǔ)上加用胰高血糖素樣肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)受體激動(dòng)劑Exendin-4,研究其對(duì)甲基乙二醛誘導(dǎo)PC12細(xì)胞氧化應(yīng)激的影響及其機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)與方法:傳代培養(yǎng)PC12細(xì)胞,不同濃度甲基乙二醛(0~2.0mmol/l)處理PC12細(xì)胞12h~

2、48h,MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞存活率;在此基礎(chǔ)上加用Exendin-4預(yù)處理細(xì)胞24h,0.75mmol/l甲基乙二醛干預(yù)24h,以N-乙酰半胱氨酸(NAC)預(yù)處理PC12細(xì)胞24小時(shí)為陽(yáng)性對(duì)照,MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞存活率,熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)ROS含量,黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)SOD活力。應(yīng)用Exendin-4100nmol/L或NAC10mmol/L預(yù)處理PC12細(xì)胞24小時(shí),0.75mmol/L甲基乙二醛作用1小時(shí),Western Blot檢測(cè)

3、蛋白P-IκB-α、IκB-α表達(dá)情況。
　　結(jié)果:隨著MG作用濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng),PC12細(xì)胞存活率逐漸降低;Exendin-4預(yù)處理PC12細(xì)胞24h,在25~100nmol/LExendin-4作用下,濃度依賴性地增加MG誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的存活率,但是在200nmol/LExendin-4干預(yù)組,PC12細(xì)胞的存活率并沒(méi)有比100nmol/LExendin-4干預(yù)組有進(jìn)一步升高;以NAC預(yù)處理24小時(shí)為陽(yáng)性對(duì)照,與

4、MG單獨(dú)處理組相比,Exendin-4預(yù)處理組的ROS表達(dá)量下降了65.30％(p<0.01);NAC預(yù)處理組ROS表達(dá)量下降了107.40%(p<0.01);Exendin-4預(yù)處理組的SOD活力增加了5.30U/mgprot(p<0.01);NAC預(yù)處理組的SOD活力增加了8.53U/mgprot(p<0.01)。Exendin-4預(yù)處理組的P-IκB-α/IκB-α比例下降了25.50%(p<0.01);NAC預(yù)處理組的P-IκB